目的 评估雄激素受体（AR）的GGN重复多态性与卵巢储备及在控制性卵巢刺激（COS）中的卵巢反应的关联。 方法 在一所大学附属的体外授精胚胎移植中心进行的这项遗传关联研究中，共有361名年龄≤40岁、基础卵泡刺激素≤12 IU/L的女性接受了GnRH激动剂长方案进行COS。对AR基因中的GGN重复进行了Sanger测序分析。主要终点是窦卵泡计数（AFCs），次要终点包括刺激天数、使用的促性腺激素（Gn）总剂量、取卵总数、卵巢敏感性指数（OSI）和卵泡输出率（FORT）。 结果 AR基因第1外显子中的GGN重复长度13~24，观察到的中位重复长度为22。考虑基因型（GGN重复<22为S，GGN重复≥22为L）时，所有患者被分为3组：SS、SL和LL。广义回归分析指出，SS组的AFCs数量显著低于SL组（调整后β值1.8；95% CI：0.2-3.4；P=0.024）或与LL组比较（调整后β值1.5；95% CI：0.2-2.7；P=0.021）。SL组与LL组之间的AFCs数量没有观察到显著差异。此外，广义回归分析还表明，在调整混杂因素前后，3组之间的卵巢刺激参数差异没有统计学意义。 结论 AR基因上的GGN重复长度与AFC相关，但与中国女性的卵巢反应无关，表明AR基因的多态性可能影响卵巢储备。
目的 探讨SLC1A5高表达在泛癌种的临床意义及其促进肝癌进展的机制。 方法 利用癌症基因组图谱（TCGA）、国际肿瘤基因组协会（ICGC）等数据库探讨SLC1A5在泛癌种的表达水平及其与临床分期、淋巴结转移及生存预后的关系；利用EPIC、CIBERSORT、TIMER算法分析SLC1A5与免疫细胞浸润的关系，分析SLC1A5联合M2型巨噬细胞浸润水平与肿瘤预后的关系。利用慢病毒过表达系统构建过表达SLC1A5肝癌细胞株；利用小干扰RNA（siRNA）构建沉默SLC1A5（NC组、si-SLC1A5-1组、si-SLC1A5-2组）的肝癌细胞株；CCK-8增殖实验检测SLC1A5对肝癌细胞增殖的影响；利用过表达SLCA5稳转株（NC组，SLC1A5过表达组）构建肝癌皮下瘤模型，体内水平探讨SLC1A5对肝癌增殖的影响；利用共培养体系验证干扰和过表达SLC1A5肝癌细胞对巨噬细胞极化的影响。 结果 SLC1A5主要定位于细胞膜上，SLC1A5在大多数肿瘤中均显著高表达（P<0.05），其表达水平与临床分期及淋巴结转移呈正相关（P<0.05）；SLC1A5高表达与多癌种不良预后相关（P<0.05）。在13个癌种中显示SLC1A5与免疫评分呈正相关，二者相关性在低级别胶质瘤（LGG）、肝癌（LIHC）及甲状腺癌（THCA）中最显著（P<0.05）。多癌种显示SLC1A5与巨噬细胞浸润水平呈正相关（P<0.05），该相关性在LGG及LIHC中最显著；而在包括肺鳞癌、胰腺癌、胃癌在内的5种肿瘤中，二者呈负相关（P<0.05）。生存分析发现SLC1A5高表达且M2型巨噬细胞高浸润水平的患者生存预后最差（P<0.05）；SLC1A5与免疫抑制相关基因、细胞因子及细胞因子受体表达呈正相关，该相关性在LGG、LIHC中最显著（P<0.05）。不同肝癌细胞株均高表达SLC1A5，过表达SLC1A5促进肝癌细胞增殖，干扰SLC1A5则抑制肝癌细胞增殖；体内实验验证过表达SLC1A5促进肝癌增殖。SLC1A5与M2型巨噬细胞极化分子标志物表达呈正相关，过表达SLC1A5促进M2型巨噬细胞极化并抑制T细胞分泌IFN-γ。 结论 SLC1A5与多种肿瘤的临床分期、淋巴结转移、预后及免疫浸润水平相关；SLC1A5通过促进M2型巨噬细胞极化抑制T细胞功能来促进肝癌进展。
目的 在胃癌组织及癌旁组织中分析SPAG5的表达情况，通过干扰SPAG5分析其在胃癌细胞生长中的生物学作用。 方法 结合TCGA分析，免疫组织化学、免疫荧光染色分析SPAG5及MKi67在胃癌及癌旁组织中的表达模式，利用胃癌细胞AGS和MGC803进行体外细胞生物学实验，分别设置空白对照组和干扰组，采用慢病毒干扰，其中空白对照转染shCtrl，干扰组转染shSPAG5。通过Celigo、MTT和克隆形成实验、凋亡检测分析敲减SPAG5基因后对胃癌细胞生长的影响。 结果 Proteinatlas数据库、TCGA数据库分析结果发现SPAG5在胃癌中高表达，KM-plot及GEPIA数据库分析SPAG5在肺腺癌、乳腺癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、膀胱癌中高表达，免疫组化发现SPAG5在胃癌中高表达（P<0.001），免疫组化和免疫荧光共聚焦证明SPAG5与MKi67存在显著相关性（R=0.393，P<0.001）。Real time-PCR及Western blotting结果显示SPAG5在MKN74、BGC823、MGC803、SGC7901和AGS等细胞中表达水平较高（P<0.01）。敲减SPAG5后mRNA和蛋白的表达下降，Celigo、MTT和克隆形成实验结果显示敲减SPAG5抑制胃癌细胞增殖（P<0.01），流式凋亡分析发现敲减SPAG5促进胃癌细胞凋亡（P<0.001）。 结论 SPAG5和MKi67在胃癌组织中的表达具有相关性，干扰SPAG5基因可以抑制胃癌细胞的增殖。SPAG5与患者预后相关，可能成为胃癌的潜在标志物。
目的 探讨化橘红配方颗粒治疗脂肪性肝病（FLD）的药效作用和具体机制。 方法 将受精后3 d的斑马鱼幼鱼随机分为空白组、模型对照组、化橘红配方颗粒处理组（16、32、64 μg/mL），分别构建斑马鱼幼鱼非酒精性脂肪肝（NAFLD）和酒精性脂肪肝（ALD）模型，采用生存分析、病理组织切片、全鱼油红O染色和实时定量荧光PCR实验评价化橘红配方颗粒治疗FLD的药效，并从CAV1和铁代谢及铁死亡角度探讨其治疗FLD的具体机制，通过普鲁士蓝染色、DCFH-DA活体探针、丙二醛含量检测、实时定量荧光PCR实验和CAV1免疫组织化学染色分析化橘红配方颗粒治疗FLD的药效验证和具体机制。 结果 化橘红配方颗粒能减轻斑马鱼幼鱼NAFLD和ALD模型中的脂质累积，减少脂肪酸合成酶、固醇调节元件结合蛋白1、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶、肿瘤坏死因子-α和白介素6的表达水平，升高载脂蛋白A1和PPARα表达水平。化橘红配方颗粒可以减少斑马鱼幼鱼NAFLD和ALD模型中肝脏的铁沉积，减少幼鱼体内的丙二醛和活性氧含量（P<0.05）。NAFLD状态下，不同浓度的化橘红配方颗粒可升高Tf、TfR、FPN和SLC7A11表达（P<0.05），中、高浓度的化橘红配方颗粒可升高谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的表达（P<0.05）；ALD状态下，斑马鱼幼鱼的Tf、TfR和FPN表达升高，不同浓度的化橘红配方颗粒可降低这些基因的表达（P<0.05）。化橘红配方颗粒对ALD状态下SLC7A11的表达无明显影响，但高浓度的化橘红配方颗粒可升高GPX4的表达（P<0.05），免疫组织化学染色和实时定量荧光PCR实验结果显示，在NAFLD和ALD状态下，斑马鱼幼鱼肝脏的CAV1升高，而中、高浓度的化橘红配方颗粒可明显改善评价两种脂肪肝状态下斑马鱼幼鱼肝脏的CAV1表达。 结论 化橘红配方颗粒可减轻NAFLD和ALD的脂质累积和炎症反应，并通过减少CAV1的表达纠正NAFLD和ALD的铁稳态失衡、脂质过氧化和铁死亡。
目的 探索低强度脉冲超声（LIPUS）联合制霉菌素（NYS）对阴道白色念珠菌生物被膜感染的治疗效果。 方法 建立体外白色念珠菌生物被膜模型，同时将体外培养成熟的生物被膜用自动微移液管接种至20只雌性新西兰大白兔阴道内，以建立兔阴道白色念珠菌生物被膜感染模型，实验分为Control组、NYS组、US组和联合治疗组。体外实验采用XTT法检测生物被膜最低抑菌浓度（MIC），结晶紫染色定量生物被膜，激光共聚焦显微镜（CLSM）观察生物被膜活性，扫描电镜（SEM）观察形态学变化，DCFH-DA检测活性氧（ROS）。体内实验通过观察兔外阴症状，HE染色和透射电镜（TEM）观察治疗前后阴道组织病理结构变化。 结果 体外实验显示，联合治疗组MIC50和MIC80相比NYS组均降低2倍（P<0.05），此外，联合治疗组生物被膜清除率分别比NYS组和US组增加约26%和68%（P<0.001），同时联合治疗组生物被膜活性更低、结构破坏更严重，ROS产量更多。体内实验表明，与NYS组和US组比较，联合治疗组兔外阴症状与炎症浸润显著改善（P<0.05），阴道残留菌丝/菌株减少，上皮超微结构明显改善。 结论 LIPUS联合NYS对体内外白色念珠菌生物被膜有显著的协同抗真菌作用。
目的 基于网络药理学探讨清心解瘀颗粒（QXJYG）抗动脉粥样硬化（AS）的药效学及其调控机制。 方法 通过网络药理学挖掘QXJYG抗AS的关键靶点和信号通路。采用高脂喂养合并腹腔注射维生素D3的方式构建AS大鼠模型，将造模成功后的30只大鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组（13.15 mg·kg-1·d-1）、低剂量组（0.99 g·kg-1·d-1）、中剂量组（1.98 g·kg-1·d-1）、高剂量组（3.96 g·kg-1·d-1），每组6只；另外将6只SD大鼠给予正常饮食作为对照组。实验动物干预8周后，通过小动物超声检测大鼠腹主动脉血管内径、血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数，通过HE染色检测大鼠腹主动脉病理形态，通过全自动生化仪检测每组大鼠的血脂水平，通过ELISA检测试剂盒测定血清中AngⅡ、ET-1、TXA2、PGI2、ox-LDL含量。采用免疫组化法检测大鼠腹主动脉中LOX-1、PPARγ、RXRα、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白的表达。 结果 与正常组相比，模型组的腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数升高（P<0.05），血管内径减小（P<0.05），且平滑肌细胞增生、排列紊乱，TC、LDL-C、AngⅡ、ET-1、TXA2含量显著升高（P<0.05），HDL-C、PGI2含量显著下降（P<0.05）。与模型组相比，QXJYG和阿托伐他汀干预后，显著降低腹主动脉血管壁厚度、脉冲波传播速度、搏动指数（P<0.05），增大血管内径（P<0.05），减轻平滑肌细胞排列紊乱情况，显著降低TC、LDL-C，AngⅡ、ET-1、TXA2（P<0.05），显著升高HDL-C、PGI2含量（P<0.05），通过网络药理学预测发现QXJYG可能通过调控脂质，PPAR和NF-κB等信号通路发挥抗AS的作用。与正常组相比，模型组的ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著升高（P<0.05），PPARγ、RXRα蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与模型组相比，QXJYG干预后，ox-LDL含量、LOX-1、p-P65、VCAM-1、ICAM-1蛋白表达水平显著降低（P<0.05），PPARγ、RXRα表达显著升高（P<0.05）。 结论 QXJYG显著改善AS大鼠脂代谢紊乱，扩大腹主动脉血管内径，减小腹主动脉血管壁厚度，抑制腹主动脉血管病理损伤，调节血管收缩和舒张功能。QXJYG发挥抗AS的作用机制可能是抑制血脂中ox-LDL水平，降低LOX-1的表达，激活PPARγ、RXRα蛋白，抑制P65的磷酸化，从而降低VCAM-1、ICAM-1蛋白表达。
目的 探讨Ag2Se纳米颗粒清除食管癌胞内牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的有效性，并研究清除P. gingivalis后对食管癌恶性进展的影响。 方法 采用化学合成法制备Ag2Se纳米颗粒，通过荧光染色分析和菌落形成实验，评估Ag2Se纳米颗粒对P. gingivalis活性和克隆形成能力的影响；构建P. gingivalis感染的小鼠食管癌皮下荷瘤模型，通过RNAscope原位杂交和定量聚合酶链反应（qPCR）测定治疗后肿瘤组织中P. gingivalis的丰度，并监测荷瘤小鼠肿瘤体积的变化，以评估Ag2Se纳米颗粒清除肿瘤组织中P. gingivalis后对小鼠食管癌恶性进展的影响。通过评估小鼠肝肾功能及主要脏器的病理变化，以评估Ag2Se纳米颗粒的生物安全性。 结果 透射电子显微镜（TEM）的结果显示，本研究制备的Ag2Se为直径50 nm左右的均匀分散球形纳米颗粒。体外实验结果表明Ag2Se纳米颗粒能降低P. gingivalis的活力和克隆增殖能力，且随浓度的增加而逐渐增强（P<0.05）。体内实验结果证实，经Ag2Se纳米颗粒治疗后，小鼠肿瘤组织中P. gingivalis的丰度降低、恶性增殖能力得到抑制（P<0.01）。治疗期间小鼠的肝肾功能和主要脏器未出现明显损伤，提示Ag2Se纳米颗粒具有良好的生物相容性。 结论 Ag2Se纳米颗粒对P. gingivalis具有显著的杀伤和抑制作用，在体内可有效清除胞内P. gingivalis，抑制食管癌的恶性进展，为食管癌的预防和治疗提供新的理论依据。
目的 基于网络药理学与16S rRNA高通量测序探究百蕊草（TCT）治疗抗生素相关性腹泻（AAD）的作用机制。 方法 通过网络药理学收集百蕊草与AAD的共有靶点与基因，构建蛋白质相互作用网络，使用KEGG通路富集分析筛选关键信号通路，使用AutoDock Vina进行分子对接验证，并使用GROMACS进行分子动力学模拟以验证活性成分与核心靶点的静态及动态结合变化。动物实验部分采用灌胃盐酸林可霉素建立AAD小鼠模型，40只KM小鼠随机分为空白对照组、自然恢复组（NR）、TCT低剂量组（TCT-L）、TCT高剂量组（TCT-H），雌雄各半（n=10）。实验期间每天分别灌胃给予1%羧甲基纤维素钠和1.5 g/kg和3 g/kg的百蕊草凝胶溶液，观察并记录小鼠体质量变化和腹泻情况。使用HE染色观察各组小鼠结肠病理变化，使用ELISA法检测炎症因子IL-6和TNF-α含量，使用16S rRNA测序技术检测小鼠肠道菌群的变化，采用Western blotting检测各组小鼠EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。 结果 网络药理学筛选得到66个百蕊草活性成分，并预测得到998个相关靶点，与1304个AAD靶点基因取交集得到68个潜在靶点，其中核心靶点有EGFR、STAT3、PIK3CA等。KEGG富集分析提示百蕊草主要通过PI3K/Akt信号通路发挥作用。分子对接结果显示核心靶点EGFR与coniferin结合自由能最低，分子动力学模拟结果显示EGFR与coniferin在10 ns时保持稳定的构象，Gibbs自由能结果显示，当蛋白质回旋半径值为3.11~3.15且均方根偏差值为0.35~0.5时，EGFR与coniferin复合物处于相对稳定的构象状态。动物实验显示，百蕊草可改善小鼠结肠组织形态，减少炎症因子分布，降低结肠组织中TNF-α和IL-6水平（P<0.001）；提高肠道菌群多样性（P<0.05），调节关键菌群如联合乳杆菌属、拟杆菌属等的丰度；降低结肠组织p-EGFR、p-PI3K、p-Akt蛋白水平（P<0.01）。 结论 百蕊草能通过调节肠道菌群结构，调控EGFR/PI3K/Akt信号通路，降低TNF-α和IL-6炎症因子水平，达到治疗AAD的作用。
目的 探讨电针百会、神庭对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用机制。 方法 将雄性SD大鼠48只随机分为假手术组、模型组、电针组和非穴组，12只/组。采用Longa法制备局灶性缺血损伤大鼠模型。电针干预大鼠百会、神庭穴7 d。观察大鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积变化、学习记忆功能、海马CA1区病理变化、神经元及突触超微结构，并计数突触密度、血清血清γ-氨基丁酸（GABA）、海马组织中GABAARα1、钙调蛋白依赖性蛋白激酶II（CaMKⅡ）、突触素1（SYN1）和突触后致密蛋白-95（PSD-95）蛋白及mRNA表达情况、SYN1和PSD-95表达水平。 结果 与模型组比较，电针组大鼠神经功能缺损评分降低（1.75±0.45 vs 1.50±0.67，P<0.05）；脑梗死体积降低（11.25±6.22 vs 3.51±2.21，P<0.05）；逃避潜伏期降低下降（62.65±5.12 vs 51.83±6.19，P<0.05）及穿越平台次数增加（1.17±0.75 vs 3.17±0.75，P<0.05）；缺血侧海马CA1区神经细胞数量增加；突触间隙宽度相对变小，突触小体相对增加（2.00±0.11 vs 4.00±0.25， P<0.05）；血清中GABA含量上升（3.90±0.75 vs 5.54±0.35，P<0.05）；海马组织中GABAARα1、SYN1和PSD-95 mRNA表达水平升高（P<0.05）；CaMKⅡ mRNA表达水平下降（P<0.05）。 结论 电针百会、神庭可改善脑缺血再灌注损伤大鼠学习记忆功能，其机制可能通过促进突触再生，上调GABAARα1、SYN1和PSD-95表达，下调CaMKⅡ表达有关。
