目的 评估雄激素受体（AR）的GGN重复多态性与卵巢储备及在控制性卵巢刺激（COS）中的卵巢反应的关联。 方法 在一所大学附属的体外授精胚胎移植中心进行的这项遗传关联研究中，共有361名年龄≤40岁、基础卵泡刺激素≤12 IU/L的女性接受了GnRH激动剂长方案进行COS。对AR基因中的GGN重复进行了Sanger测序分析。主要终点是窦卵泡计数（AFCs），次要终点包括刺激天数、使用的促性腺激素（Gn）总剂量、取卵总数、卵巢敏感性指数（OSI）和卵泡输出率（FORT）。 结果 AR基因第1外显子中的GGN重复长度13~24，观察到的中位重复长度为22。考虑基因型（GGN重复<22为S，GGN重复≥22为L）时，所有患者被分为3组：SS、SL和LL。广义回归分析指出，SS组的AFCs数量显著低于SL组（调整后β值1.8；95% CI：0.2-3.4；P=0.024）或与LL组比较（调整后β值1.5；95% CI：0.2-2.7；P=0.021）。SL组与LL组之间的AFCs数量没有观察到显著差异。此外，广义回归分析还表明，在调整混杂因素前后，3组之间的卵巢刺激参数差异没有统计学意义。 结论 AR基因上的GGN重复长度与AFC相关，但与中国女性的卵巢反应无关，表明AR基因的多态性可能影响卵巢储备。
目的 探讨Nrf2/HO-1抗氧化通路在氯氰菊酯（CYP）诱导的C57BL/6小鼠海马氧化损伤中的作用及其机制。 方法 将10周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组和CYP低剂量（5 mg/kg）、中剂量（10 mg/kg）、高剂量（20 mg/kg）组，连续3周经口灌胃染毒，检测海马组织丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）及过氧化氢酶水平。HE染色观察海马组织细胞形态学变化。免疫荧光双标技术检测Nrf2/HO-1蛋白在海马锥体层神经元细胞中的表达。RT-qPCR及Western blotting检测Nrf2及其下游靶激酶HO-1的mRNA与蛋白表达。 结果 与对照组相比，CYP暴露组脂质过氧化产物丙二醛含量逐渐增加，GSH-PX、T-SOD、过氧化氢酶等抗氧化酶活性逐渐下降，差异具有统计学意义（P<0.01）。HE结果显示，海马CA1、CA3区锥体层神经元受损，且暴露剂量越高损伤越严重。免疫荧光结果显示，CYP暴露引起Nrf2细胞核易位，Nrf2/HO-1蛋白共表达增加。RT-qPCR与Western blotting结果显示，CYP暴露诱导Nrf2及其下游靶激酶HO-1 mRNA与蛋白表达上调（P<0.01）。 结论 抗氧化通路Nrf2/HO-1调控CYP诱导的C57BL/6小鼠海马氧化损伤，且损伤效应与暴露水平呈现剂量效应关系。
目的 探讨SLC1A5高表达在泛癌种的临床意义及其促进肝癌进展的机制。 方法 利用癌症基因组图谱（TCGA）、国际肿瘤基因组协会（ICGC）等数据库探讨SLC1A5在泛癌种的表达水平及其与临床分期、淋巴结转移及生存预后的关系；利用EPIC、CIBERSORT、TIMER算法分析SLC1A5与免疫细胞浸润的关系，分析SLC1A5联合M2型巨噬细胞浸润水平与肿瘤预后的关系。利用慢病毒过表达系统构建过表达SLC1A5肝癌细胞株；利用小干扰RNA（siRNA）构建沉默SLC1A5（NC组、si-SLC1A5-1组、si-SLC1A5-2组）的肝癌细胞株；CCK-8增殖实验检测SLC1A5对肝癌细胞增殖的影响；利用过表达SLCA5稳转株（NC组，SLC1A5过表达组）构建肝癌皮下瘤模型，体内水平探讨SLC1A5对肝癌增殖的影响；利用共培养体系验证干扰和过表达SLC1A5肝癌细胞对巨噬细胞极化的影响。 结果 SLC1A5主要定位于细胞膜上，SLC1A5在大多数肿瘤中均显著高表达（P<0.05），其表达水平与临床分期及淋巴结转移呈正相关（P<0.05）；SLC1A5高表达与多癌种不良预后相关（P<0.05）。在13个癌种中显示SLC1A5与免疫评分呈正相关，二者相关性在低级别胶质瘤（LGG）、肝癌（LIHC）及甲状腺癌（THCA）中最显著（P<0.05）。多癌种显示SLC1A5与巨噬细胞浸润水平呈正相关（P<0.05），该相关性在LGG及LIHC中最显著；而在包括肺鳞癌、胰腺癌、胃癌在内的5种肿瘤中，二者呈负相关（P<0.05）。生存分析发现SLC1A5高表达且M2型巨噬细胞高浸润水平的患者生存预后最差（P<0.05）；SLC1A5与免疫抑制相关基因、细胞因子及细胞因子受体表达呈正相关，该相关性在LGG、LIHC中最显著（P<0.05）。不同肝癌细胞株均高表达SLC1A5，过表达SLC1A5促进肝癌细胞增殖，干扰SLC1A5则抑制肝癌细胞增殖；体内实验验证过表达SLC1A5促进肝癌增殖。SLC1A5与M2型巨噬细胞极化分子标志物表达呈正相关，过表达SLC1A5促进M2型巨噬细胞极化并抑制T细胞分泌IFN-γ。 结论 SLC1A5与多种肿瘤的临床分期、淋巴结转移、预后及免疫浸润水平相关；SLC1A5通过促进M2型巨噬细胞极化抑制T细胞功能来促进肝癌进展。
目的 探讨单独及联合应用动态对比增强磁共振成像（DCE）、扩散加权成像（DWI）和T2加权成像（T2WI）的形态学特征对乳腺癌的诊断价值。 方法 回顾性分析394例行3.0T磁共振成像（MRI）检查并经病理学确诊的乳腺病变患者的影像资料。由经过培训的放射科医师分析DCE、DWI和T2WI病灶的形态学特征，对良恶性病变进行组间比较。采用Logistic回归分析构建乳腺癌临床预测模型，使用受试者工作特征曲线下面积（AUC）和DeLong检验比较诊断效能。 结果 对于肿块样病变，所有形态学特征在DCE、DWI和T2WI上均可区分良恶性病变（P<0.05）。联合诊断方法（DCE+DWI+T2WI）的AUC（0.865）高于单独诊断方法（DCE：0.786；DWI：0.793；T2WI：0.809）（P<0.05）。对于非肿块样病变，DWI信号强度是恶性病变的显著预测因子（P=0.036），但DWI诊断模型的AUC较低（0.669）。 结论 综合分析DCE、DWI和T2WI的形态学特征可提高乳腺肿块样病变的诊断效能。
目的 基于巨噬细胞中GBP5调控NLRP3炎症小体活化，探究精胺（Spm）治疗肠道病毒71型（EV71）感染引起的重症手足口病的机制。 方法 体内实验：将3~5 d龄的BALB/c乳鼠随机分为对照组（CON组）、感染组（EV71组）、治疗组（SPM组），感染组和治疗组每只腹腔注射浓度为1×106半数组织培养感染剂量（TCID50）病毒液50 μL，治疗组在注射病毒3 d后注射100 μmol/L 精胺50 μL，对照组腹腔注射无菌PBS 50 μL。观察小鼠状态1周，提取小鼠心、肝、肺及肾组织全蛋白、RNA及组织切片，Western blotting、qPCR检测小鼠组织GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达水平，HE染色观察小鼠组织损伤及炎症细胞浸润状况，免疫组化法观察组织巨噬细胞浸润情况及GBP5的表达水平。体外实验：分别设置对照组（CON组）、感染组（EV71组）、治疗组（SPM组）、多胺生物合成抑制剂组。提取THP-1及RAW细胞RNA，通过RT-PCR检测细胞GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达水平。 结果 与对照组相比，小鼠在感染EV71后心、肝、肺及肾组织出现明显损伤，其中心、肺组织中明显观察到巨噬细胞的浸润。心、肝、肺及肾组织中GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达水平明显升高（P<0.05）；经精胺治疗后，与感染组相比治疗组小鼠组织损伤明显改善，心、肺组织中的巨噬细胞浸润减少。精胺治疗后小鼠心、肝、肺及肾组织中NLRP3、GBP5、CXCL10、TNFSF10表达水平降低（P<0.05）。在THP-1及RAW细胞中发现，感染EV71病毒后GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达升高（P<0.05），经精胺治疗后细胞中GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达降低（P<0.05）。在THP-1细胞中使用多胺生物合成抑制剂减少精胺合成可改善由GBP5 siRNA干扰引起的GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达降低（P<0.05）。 结论 精胺治疗可以降低EV71感染引起的巨噬细胞中GBP5介导的NLRP3炎症小体活化，减少炎症因子释放从而发挥治疗儿童重症手足口病的作用。
目的 基于AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/沉默调节蛋白1（SIRT1）/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）通路探讨参芪补中方对COPD大鼠线粒体功能障碍的影响。 方法 将60只SD大鼠随机分为正常组（Control）、模型组（Model）、参芪补中方低剂量组（SQBZ-L）、参芪补中方中剂量组（SQBZ-M）、参芪补中方高剂量组（SQBZ-H）、氨茶碱组（APL），10只/组。除正常组外，其余各组通过脂多糖气道滴注、香烟烟熏联合番泻叶浸液灌胃构建COPD模型，参芪补中方组和氨茶碱组分别于第50天进行参芪补中方和氨茶碱灌胃，2次/d，连续灌胃给药4周。检测各组大鼠肺功能，HE染色和透射电镜观察各组大鼠肺组织病理形态和超微结构改变，WST-1法、比色法、TBA法、JC-1法分别检测大鼠肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、三磷酸腺苷（ATP）、丙二醛（MDA）含量及线粒体膜电位，流式细胞术检测大鼠ROS平均荧光强度，Western blotting法检测肺组织中P-AMPKα、AMPKα、SIRTI、PGC-1α蛋白表达水平。 结果 与对照组相比，模型组大鼠肺功能下降、肺组织病理损伤严重（P<0.01），SOD活性、ATP水平及线粒体膜电位下降（P<0.01），MDA水平和ROS平均荧光强度显著提高（P<0.01），线粒体损伤加重，P-AMPKα、SIRTI、PGC-1α蛋白表达水平下降（P<0.01）；与模型组相比，参芪补中方各剂量组与氨茶碱组能有效改善COPD大鼠的肺功能、肺组织病理损伤（P<0.05，P<0.01），提高SOD活性、ATP含量及线粒体膜电位（P<0.05，P<0.01），降低MDA含量和ROS平均荧光强度（P<0.05，P<0.01），上调P-AMPKα、SIRTI、PGC-1α蛋白表达水平（P<0.05，P<0.01）；参芪补中方高剂量组与氨茶碱组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 参芪补中方可能通过激活AMPK/SIRT1/PGC-1α通路改善COPD大鼠的线粒体功能障碍。
目的 探索低强度脉冲超声（LIPUS）联合制霉菌素（NYS）对阴道白色念珠菌生物被膜感染的治疗效果。 方法 建立体外白色念珠菌生物被膜模型，同时将体外培养成熟的生物被膜用自动微移液管接种至20只雌性新西兰大白兔阴道内，以建立兔阴道白色念珠菌生物被膜感染模型，实验分为Control组、NYS组、US组和联合治疗组。体外实验采用XTT法检测生物被膜最低抑菌浓度（MIC），结晶紫染色定量生物被膜，激光共聚焦显微镜（CLSM）观察生物被膜活性，扫描电镜（SEM）观察形态学变化，DCFH-DA检测活性氧（ROS）。体内实验通过观察兔外阴症状，HE染色和透射电镜（TEM）观察治疗前后阴道组织病理结构变化。 结果 体外实验显示，联合治疗组MIC50和MIC80相比NYS组均降低2倍（P<0.05），此外，联合治疗组生物被膜清除率分别比NYS组和US组增加约26%和68%（P<0.001），同时联合治疗组生物被膜活性更低、结构破坏更严重，ROS产量更多。体内实验表明，与NYS组和US组比较，联合治疗组兔外阴症状与炎症浸润显著改善（P<0.05），阴道残留菌丝/菌株减少，上皮超微结构明显改善。 结论 LIPUS联合NYS对体内外白色念珠菌生物被膜有显著的协同抗真菌作用。
目的 基于网络药理学与16S rRNA高通量测序探究百蕊草（TCT）治疗抗生素相关性腹泻（AAD）的作用机制。 方法 通过网络药理学收集百蕊草与AAD的共有靶点与基因，构建蛋白质相互作用网络，使用KEGG通路富集分析筛选关键信号通路，使用AutoDock Vina进行分子对接验证，并使用GROMACS进行分子动力学模拟以验证活性成分与核心靶点的静态及动态结合变化。动物实验部分采用灌胃盐酸林可霉素建立AAD小鼠模型，40只KM小鼠随机分为空白对照组、自然恢复组（NR）、TCT低剂量组（TCT-L）、TCT高剂量组（TCT-H），雌雄各半（n=10）。实验期间每天分别灌胃给予1%羧甲基纤维素钠和1.5 g/kg和3 g/kg的百蕊草凝胶溶液，观察并记录小鼠体质量变化和腹泻情况。使用HE染色观察各组小鼠结肠病理变化，使用ELISA法检测炎症因子IL-6和TNF-α含量，使用16S rRNA测序技术检测小鼠肠道菌群的变化，采用Western blotting检测各组小鼠EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。 结果 网络药理学筛选得到66个百蕊草活性成分，并预测得到998个相关靶点，与1304个AAD靶点基因取交集得到68个潜在靶点，其中核心靶点有EGFR、STAT3、PIK3CA等。KEGG富集分析提示百蕊草主要通过PI3K/Akt信号通路发挥作用。分子对接结果显示核心靶点EGFR与coniferin结合自由能最低，分子动力学模拟结果显示EGFR与coniferin在10 ns时保持稳定的构象，Gibbs自由能结果显示，当蛋白质回旋半径值为3.11~3.15且均方根偏差值为0.35~0.5时，EGFR与coniferin复合物处于相对稳定的构象状态。动物实验显示，百蕊草可改善小鼠结肠组织形态，减少炎症因子分布，降低结肠组织中TNF-α和IL-6水平（P<0.001）；提高肠道菌群多样性（P<0.05），调节关键菌群如联合乳杆菌属、拟杆菌属等的丰度；降低结肠组织p-EGFR、p-PI3K、p-Akt蛋白水平（P<0.01）。 结论 百蕊草能通过调节肠道菌群结构，调控EGFR/PI3K/Akt信号通路，降低TNF-α和IL-6炎症因子水平，达到治疗AAD的作用。
目的 探讨积雪草苷（AS）在保护大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）中的保护机制。 方法 将50只SD大鼠随机分为假手术组（sham）、模型组（I/R）、AS处理组。AS处理组在手术前连续2周灌胃，根据给予不同剂量的AS分为低剂量组、中剂量组、高剂量组， 10只/组。检测血清中的乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、白介素-18（IL-18）和白介素-1β（IL-1β）浓度，测量各组大鼠心肌梗死和缺血范围，并观察心肌组织的病理变化。使用Western blotting法检测心肌组织中NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β和IL-18的蛋白含量。此外，通过缺氧复氧（H/R）实验在H9C2细胞中模拟缺血再灌注损伤，并进行AS预处理。 结果 与sham组相比，I/R组心肌梗死和缺血范围增加，血清中LDH和CK-MB水平升高，心肌组织中NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β和IL-18蛋白含量升高（P<0.05）。与I/R组相比，AS处理组的心肌梗死范围、血清LDH和CK-MB水平降低，心肌组织中上述蛋白含量也降低（P<0.05），且AS的保护作用呈剂量依赖性。体外实验显示，H/R处理导致NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β和IL-18蛋白表达增加（P<0.05），而AS预处理可减轻H/R损伤（P<0.05）。分子对接结果表明，AS与NLRP3具有良好的结合活性。 结论 积雪草苷可以减轻大鼠心肌再灌注损伤，其机制可能通过抑制NLRP3炎症体介导的细胞焦亡实现。
目的 探讨Ag2Se纳米颗粒清除食管癌胞内牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的有效性，并研究清除P. gingivalis后对食管癌恶性进展的影响。 方法 采用化学合成法制备Ag2Se纳米颗粒，通过荧光染色分析和菌落形成实验，评估Ag2Se纳米颗粒对P. gingivalis活性和克隆形成能力的影响；构建P. gingivalis感染的小鼠食管癌皮下荷瘤模型，通过RNAscope原位杂交和定量聚合酶链反应（qPCR）测定治疗后肿瘤组织中P. gingivalis的丰度，并监测荷瘤小鼠肿瘤体积的变化，以评估Ag2Se纳米颗粒清除肿瘤组织中P. gingivalis后对小鼠食管癌恶性进展的影响。通过评估小鼠肝肾功能及主要脏器的病理变化，以评估Ag2Se纳米颗粒的生物安全性。 结果 透射电子显微镜（TEM）的结果显示，本研究制备的Ag2Se为直径50 nm左右的均匀分散球形纳米颗粒。体外实验结果表明Ag2Se纳米颗粒能降低P. gingivalis的活力和克隆增殖能力，且随浓度的增加而逐渐增强（P<0.05）。体内实验结果证实，经Ag2Se纳米颗粒治疗后，小鼠肿瘤组织中P. gingivalis的丰度降低、恶性增殖能力得到抑制（P<0.01）。治疗期间小鼠的肝肾功能和主要脏器未出现明显损伤，提示Ag2Se纳米颗粒具有良好的生物相容性。 结论 Ag2Se纳米颗粒对P. gingivalis具有显著的杀伤和抑制作用，在体内可有效清除胞内P. gingivalis，抑制食管癌的恶性进展，为食管癌的预防和治疗提供新的理论依据。
目的 探讨中国人群外周血肿瘤抑制可转移候选基因1（TSSC1）和黑素亲和素（MLPH）基因甲基化水平与冠心病（CHD）之间的关系。 方法 收集86例CHD患者和95例健康对照，使用定量质谱法检测TSSC1和MLPH基因的CpG位点甲基化水平。使用Mann-Whitney秩和检验比较不同临床特征组间的甲基化水平差异。通过Spearman相关系数和列联系数分别评估甲基化水平与年龄、性别之间的相关性。 结果 与对照组相比，MLPH基因高甲基化与心肌梗死亚型相关（MLPH_CpG_2.7：P=0.045；MLPH_CpG_3/cg06639874：P=0.049；MLPH_CpG_5：P=0.019）。MLPH基因高甲基化与CHD的相关性在年龄<65岁组（MLPH_CpG_2.7：P=0.014；MLPH_CpG_4：P=0.001）和男性（MLPH_CpG_2.7：P=0.004；MLPH_CpG_3/cg06639874：P=0.044）中更加明显。未观察到外周血TSSC1基因甲基化改变与CHD及其亚型的相关性。 结论 中国人群外周血中MLPH基因高甲基化与CHD及心肌梗死具有相关性，尤其是65岁以下群体和男性群体。
目的 筛选槲皮素治疗肾透明细胞癌（ccRCC）的潜在分子靶点。 方法 运用网络药理学方法从多个数据库中筛选槲皮素的治疗靶点，运用孟德尔随机化方法从4907种血浆蛋白中筛选与ccRCC显著相关的靶点，构建药物-疾病网络模型，筛选出潜在的关键靶点，运用生物信息学技术评估这些靶点的作用，培养ccRCC细胞并用不用浓度槲皮素处理，行CCK-8实验、创伤愈合实验、RT-qPCR和Western blotting对筛选靶点进行验证。 结果 网络药理学和孟德尔随机化综合分析筛选出了TP53（OR=3.325，95% CI：1.805-6.124，P=0.0001）、ARF4（OR=0.173，95% CI：0.065-0.456，P=0.0003）和DPP4（OR=0.463，95% CI：0.302-0.711，P=0.0004）3个槲皮素治疗ccRCC的核心靶点。生物信息学分析表明TP53在肾透明细胞癌中表达增高（P<0.001）；生存分析显示高表达TP53的肾癌患者预后更差（P<0.001）；分子对接显示槲皮素与TP53的结合能为-5.83 kcal/mol；CCK-8实验和创伤愈合实验显示槲皮素在体外抑制786-O细胞的增殖和迁移（P<0.05）；RT-qPCR和Western blotting显示槲皮素在体外抑制TP53 mRNA和蛋白的表达（P<0.05）。 结论 TP53可能是槲皮素治疗ccRCC的关键靶点，为槲皮素治疗肾透明细胞癌的分子机制研究奠定了基础。
目的 探讨桑麻止咳方（SMZKF）对感染后咳嗽（PIC）大鼠咳嗽敏感性和气道炎症的改善作用及其机制。 方法 SD雄性大鼠随机分为对照组，模型组，SMZKF低、中、高剂量组，复方甲氧那明组（ASM），8只/组。除对照组外，其余大鼠采用烟熏+鼻滴脂多糖+辣椒素雾化构PIC大鼠模型，第19天开始灌胃SMZKF和复方甲氧那明，连续10 d。分析各组大鼠行为学状态、咳嗽敏感性、肺组织病理、肺泡灌洗液（BALF）炎性细胞计数和炎性因子/介质、肺组织氧化应激以及咳嗽敏感性和细胞焦亡相关蛋白的表达。 结果 与对照组比较，模型组大鼠精神欠佳，呼吸加快，出现明显咳嗽、打喷嚏、抓脸等表现；咳嗽潜伏期明显缩短，5 min咳嗽次数增加；肺泡结构消失，肺泡隔增宽，支气管及支气管周围有大量炎性细胞浸润，支气管周围和肺泡炎症评分明显升高；BALF中炎性细胞计数和炎性因子/介质IL-1β、TNF-α、IL-6、COX-2、PGE-2、TXA-2均升高；肺组织ROS、MDA、MPO升高；肺组织咳嗽高敏感性相关蛋白TRPV1、SP、CGRP、NK1R和细胞焦亡相关蛋白P-NF-κB、NLRP3、ACS、cleaved-caspase-1、cleaved-IL-1β和GSDMD-N表达升高（P<0.05）。与模型组比较，SMZKF能改善各项指标的病理改变（P<0.05），且SMZKF高剂量与复方甲氧那明干预效果的差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 SMZKF能有效改善PIC模型大鼠咳嗽敏感性和气道炎症，其作用机制与抑制TRPV1介导的SP/NK1R与CGRP释放和细胞焦亡途径密切相关。
目的 基于中国人群的心电大数据开发早期房颤风险预测模型。 方法 回顾性纳入2009年~2023年于解放军总医院有多次心电图检查记录的患者30 383例。患者按7∶3的比例随机划分为训练集和内部测试集。使用训练集数据，采用单因素分析、LASSO回归、Boruta算法筛选预测因子。基于Cox比例风险回归建立心电模型以及结合年龄、性别和心电模型评分的复合模型。采用受试者工作特征分析曲线下面积（AUROC）、校准曲线、决策曲线评估模型区分度、校准度及临床净获益。 结果 纳入患者的中位年龄为51（36，62）岁，男性占比51.1%，房颤的发生率为4.5%（1370/30 383）。在心电模型中，P波相关参数及QRS波相关参数是重要预测变量。在测试集中，心电模型预测5年房颤风险的AUROC为0.77（95% CI：0.74-0.80），加入年龄和性别后的复合模型AUROC提升至0.81（95% CI：0.78-0.83），净重新分类指数为0.123，综合判别改善指数为0.04（P<0.05）。模型校准曲线斜率接近对角线。决策曲线分析显示复合模型的临床净获益在绝大多数风险阈值范围内均高于心电模型。 结论 基于中国人群窦性心律期间的心电图定量特征及年龄和性别开发的复合模型可有效预测未来房颤风险，为房颤的早期风险评估及预防干预提供了低成本的筛查工具。
目的 基于网络药理学探讨调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全（POI）的作用机制，通过动物实验进行验证，并设计临床对照试验验证调周滋阴方对该病的临床疗效。 方法 利用TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction、Genecards、OMIM等数据库筛选相应靶点，获取核心PPI，进行GO、KEGG富集分析，构建“疾病-通路-靶点-成分-药物”网络，采用AutoDock对核心活性成分和核心靶点进行分子对接验证。通过动物实验，采用Western blotting进一步验证网络药理学结果。设计临床对照试验，对照组予芬吗通治疗，试验组在此基础上加用调周滋阴方，通过观察两组内分泌指标（FSH、LH、E2、AMH）、窦卵泡数、Kupperman评分、不良反应发生率及妊娠率，验证调周滋阴方治疗该病的临床有效性。 结果 通过网络药理学方法，得到调周滋阴方治疗早发性卵巢功能不全的潜在靶点有163个；核心活性成分主要为山奈酚、β-谷甾醇、木犀草素、槲皮素，核心靶点主要为SRC、TP53、STAT3、PIK3CA、MAPK3等；GO功能富集主要包括细胞运动的正调控、蛋白质磷酸化等；KEGG富集通路主要包括癌症通路、PI3K-Akt信号通路等；分子对接结果显示核心活性成分与核心靶点间均有良好的结合能力。利用动物实验对关键通路进行验证，结果显示，与POI模型组大鼠比较，调周滋阴方可升高POI大鼠卵巢组织中p-PI3K和p-Akt蛋白表达（P<0.05），验证了网络药理学的部分预测结果。临床试验显示，两组E2较治疗前升高，FSH、LH较治疗前降低，Kupperman评分较治疗前降低（P<0.05），且试验组优于对照组（P<0.05）；两组窦卵泡数较治疗前均升高（P<0.05），试验组AMH较治疗前升高（P<0.05），试验组与对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）；治疗结束4周后，试验组治疗效果优于同期对照组（P<0.05）。 结论 调周滋阴方具有多成分、多靶点、多途径的治疗特点，其中激活PI3K/Akt通路是其作用机制之一，从而改善POI患者卵巢储备功能，缓解临床症状，提高临床疗效，具有良好的临床应用前景。
目的 探究双氢青蒿素（DHA）协同阿霉素（DOX）对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响及潜在的分子机制。 方法 设阴性对照组（DOX、DHA均0 μmol/L），分别检测不同浓度双氢青蒿素（50、100、150 μmol/L）单独干预和双氢青蒿素与阿霉素联合干预（DOX 0.5 μmol/L、DHA 50 μmol/L、DOX 0.5 μmol/L+DHA 50 μmol/L）对MDA-MB-231细胞的影响。MTT与克隆形成实验检测细胞增殖水平；流式细胞实验检测细胞凋亡水平；Western blotting实验检测细胞PCNA、cleaved PARP、Bcl-2、Bax、STAT3、p-STAT3、HIF-1α、survivin等蛋白表达水平。 结果 DHA抑制MDA-MB-231细胞增殖的IC50为131.37±29.87 μmol/L，DHA与DOX联用组显著抑制MDA-MB-231细胞增殖（P<0.01）。相较于阴性对照组，DHA呈浓度依赖性诱导MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.01）；相较于DHA组或DOX组，DHA与DOX联用组诱导MDA-MB-231细胞凋亡（P<0.001）。相较于阴性对照组，DHA高浓度（150 μmol/L）可抑制MDA-MB-231克隆形成（P<0.01）。相较于阴性对照组，DHA下调PCNA、p-STAT3、HIF-1α、survivin蛋白表达水平（P<0.01），上调cleaved PARP蛋白表达水平（P<0.01）、Bax/ Bcl-2蛋白表达水平的比值（P<0.01），DHA与DOX联用组下调p-STAT3蛋白表达水平（P<0.05），上调Bax/Bcl-2蛋白表达水平的比值（P<0.01）。 结论 DHA联合DOX可显著增强抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用，其机制可能与DHA负向调控STAT3/HIF-1α通路有关。
目的 探讨橙皮素（Hes）通过调控AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/NOD热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）信号减轻炎症反应改善阿霉素（DOX）诱导的心肌损伤。 方法 采用DOX处理C57/bl6小鼠和H9c2细胞，并随机分为：对照组/假手术组、DOX处理组、Hes干预DOX组（DOX+Hes）以及Hes联合AMPK抑制剂Compound C干预DOX组（DOX+Hes+CC）。观察细胞形态变化，采用CCK-8法检测细胞活力，超声检测心脏功能，ELISA法检测培养基和心肌组织中LDH活性，TUNEL染色法检测细胞凋亡，RT-PCR检测TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平，Western blotting法检测cleaved caspase-3、Bcl2、Bax、IL-1β、IL-18、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、NLRP3、ASC和caspase-1的表达。 结果 与对照组相比，DOX组细胞肿胀，活力降低，培养基中LDH活性增加（P<0.01）；cleaved caspase-3表达和TUNEL染色阳性细胞数增加，Bcl2/Bax比值降低（P<0.01）。与假手术组相比，DOX组心肌纤维肿胀并出现炎性浸润，心脏功能降低，LDH活性增加；同时TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平以及IL-1β和IL-18的蛋白表达增加（P<0.01），p-AMPK和p-mTOR蛋白表达降低，NLRP3、ASC和caspase-1的表达增加（P<0.01）。与DOX组相比，DOX+Hes组细胞肿胀减轻，活力增加，培养基中LDH活性降低（P<0.01）；cleaved caspase-3表达和TUNEL染色阳性细胞数减少，Bcl2/Bax比值增加（P<0.01）；TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平以及IL-1β和IL-18的蛋白表达降低（P<0.01）；p-AMPK和p-mTOR蛋白表达增加，NLRP3、ASC和caspase-1的表达降低（P<0.01）。与DOX+Hes组相比，Compound C可以阻断Hes对DOX诱导的细胞损伤、心脏功能、炎症反应和AMPK/NLRP3通路的作用。 结论 Hes通过调控AMPK/NLRP3通路抑制炎症反应减轻DOX诱导的心脏毒性。
目的 探讨Circ_EPHB4通过miR-424-5p/Wnt3信号轴调控胶质瘤细胞替莫唑胺敏感性的机制。 方法 收集我院2019年1月~2021年12月25例原发性胶质瘤患者和25例经替莫唑胺（TMZ）基化疗治愈后的复发性胶质瘤患者组织标本。qRT-PCR检测Circ_EPHB4表达敲低及敲低对照组细胞中circ_EPHB4、miR-424-5p及Wnt3 mRNA的表达水平。Western blotting检测Wnt3蛋白表达水平。细胞活力、克隆形成和细胞凋亡分别通过CCK-8、克隆形成和流式细胞仪检测评估。采用双荧光素酶报告和RNA免疫沉淀（RIP）试验验证circ_EPHB4、miR-424-5p和Wnt3间的靶向调控关系。皮下成瘤实验评估circ_EPHB4对胶质瘤肿瘤形成能力的影响。 结果 胶质瘤组织和细胞中circ EPHB4的表达明显高于正常神经组织和星形胶质细胞（P=0.014）。与si-NC对照组相比，si-Circ_EPHB4降低了TMZ耐药胶质瘤细胞中circ_EPHB4表达水平（A172：P=0.008；SHG44：P=0.009）。circ_EPHB4表达敲低降低了TMZ耐药胶质瘤细胞对TMZ的IC50值（A172：P=0.012；SHG44：P=0.022），抑制了胶质瘤细胞克隆形成（A172：P=0.004；SHG44：P=0.006），并促进胶质瘤细胞凋亡（A172：P=0.002；SHG44：P=0.00）。胶质瘤组织中miR-424-5p和circ_EPHB4表达呈负相关（r=-0.556，P=0.011）。miR-424-5p表达敲低，逆转了circ_EPHB4表达敲低引起的IC50值下降（P=0.001）、克隆形成抑制（P=0.016）和细胞凋亡促进作用（P=0.001）。此外，miR-424-5p表达敲低，还削弱了circ_EPHB4表达敲低对PCNA、P-gp、MRP1和bax表达的影响（P=0.004）。 结论 circ_EPHB4通过“海绵吸附”miR-424-5p调控Wnt3表达，由此调节TMZ耐药胶质瘤细胞克隆形成、细胞凋亡和TMZ敏感性，circ_EPHB4是逆转胶质瘤耐药的潜在靶点。
目的 探讨电针（EA）预处理通过调节肠道微生物群和Nrf2/HO-1信号通路以及抑制铁死亡来减轻脑缺血再灌注损伤（CIRI）的潜力。 方法 诱导CIRI的大鼠接受大脑中动脉堵塞（MCAO）手术，并分为假手术组、模型组和EA治疗组，10只/组。EA治疗在百会穴（DU20）和足三里穴（ST36）于MCAO前3 d进行。评估神经功能缺损和开放场行为，使用TTC、Nissl和HE染色检查脑梗死和海马病理。通过ELISA测定脑组织中丙二醛、活性氧和超氧化物歧化酶水平，利用qRT-PCR和Western blotting分析Bax、Bcl-2、Nrf2、HO-1、GPX4和SLC7A11的表达。免疫组化检测脑组织中GPX4、Nrf2和HO-1的水平，并收集粪便样本以分析肠道微生物群。 结果 EA预处理降低了大鼠的神经功能缺损评分（P<0.05），改善了自愿运动的频率和持续时间（均P<0.05）。TTC染色显示EA组的缺血性梗死面积小于模型组（P<0.05）。Nissl染色结果显示，模型组海马神经元数量减少且Nissl物质丢失，而EA组神经元存活率提高，Nissl物质含量恢复（P<0.05）。HE染色结果显示，模型组海马神经元排列不规则且病理变化明显，而EA组的结构和活力有所改善（P<0.05）。ELISA检测显示，模型组的丙二醛和活性氧水平升高，超氧化物歧化酶水平下降（均P<0.05）；EA组则相反。EA治疗降低了Bax蛋白表达，增加了Bcl-2蛋白表达（均P<0.05），同时上调了铁死亡关键调控蛋白GPX4和SLC7A11的表达，免疫组化结果一致。EA上调Nrf2（P<0.05）和HO-1（P<0.05）的表达，激活Nrf2/HO-1信号通路，并改善肠道微生物群。 结论 电针预处理通过调节肠脑轴、激活Nrf2/HO-1信号通路、抑制细胞凋亡和铁死亡，有效缓解了大鼠脑缺血再灌注损伤，为其在缺血性脑血管疾病中的临床应用提供了科学依据。
目的 探究前扣带回皮层锥体神经元调控丰富环境缓解束缚应激致焦虑样行为的机制。 方法 C57BL/6J小鼠分为3组：正常组（CON）、束缚组（RS）和丰富环境组（RS+EE），8只/组。CON组正常实验室环境饲养，RS组给与2 h/d连续3 d的束缚应激，RS+EE组在给与2 h/d连续3 d的束缚应激的同时EE下饲养。利用高架十字迷宫实验和旷场实验评估小鼠焦虑样水平，通过免疫荧光实验检测小鼠ACC区c-Fos的变化，采用膜片钳实验检测小鼠PynACC兴奋性的变化，进一步检测PynACC的mEPSC和mIPSC的发放频率和幅度，以评估突触传递的变化。 结果 高架十字迷宫实验中，与CON组比较，RS组小鼠在开臂的停留时间减少（P<0.01），进入开臂的次数减少（P<0.05）；与RS组比较，RS+EE组小鼠在开臂的停留时间增加（P<0.01），进入开臂的次数增加（P<0.05）；旷场实验中，与CON组比较，RS组小鼠在中心区域的移动时间减少（P<0.01），进入中心区域的次数减少（P<0.01）；与RS组比较，RS+EE组小鼠在中心区域的移动时间增加（P<0.01），进入中心区域的次数增加（P<0.05）。免疫荧光实验中，与CON组比较，RS组小鼠ACC区c-Fos表达增加（P<0.001）；与RS组比较，RS+EE组小鼠前扣带回皮层c-Fos表达减少（P<0.01）。膜片钳实验中，与CON组比较，RS组小鼠PynACC动作电位发放增多（P<0.01）；与RS组比较，RS+EE组小鼠PynACC动作电位发放减少（P<0.05）；与CON组比较，RS组小鼠PynACC的mEPSC频率增加（P<0.05）；与RS组比较，RS+EE组小鼠PynACC的mEPSC频率降低（P<0.05），而幅度均没有变化；mIPSC的频率和幅度均没有变化。 结论 丰富环境降低前扣带回皮层锥体神经元兴奋性缓解束缚应激致焦虑样行为。
