摘要: 目的探讨Brugada综合征SCN5A基因新突变G1712C的电生理机制。方法采用体外定点诱变法构建携带有基因突变 G1712C的pRc/CMV-hH1的表达载体,lipo3000脂质转染法建立稳定表达pGFP-IRES-hβ1质粒的HEK293细胞系,并用G418 进行筛选鉴定。分别做野生型的pRc/CMV-hH1(hH1)和携带有基因突变G1712C的pRc/CMV-hH1(mhH1)瞬时转染表达。进 行全细胞膜片钳实验记录钠通道电流。实验结果由PatchMaster以及IGOR Pro 6.0软件分析。结果G1712C位于Na+通道蛋白 α亚单位的DⅣ区S5与S6之间的P-loop上。在瞬时转染野生型的hH1的细胞系中,指令电位从-60 mV逐渐上升时,钠电流也 渐变大,在-20 mV时完全激活;激活电压在-60 mV到-50 mV,反转电位在50 mV左右。在瞬时转染突变型G1712C的细胞系 中,没有发现钠电流。结论野生型hH1所表达的钠通道蛋白与正常心肌细胞钠通道电生理特性相似。SCN5A基因G1712C突 变导致Nav1.5通道失去功能,可能是该家系Brugada综合征的病因。