摘要:
目的 系统阐明蒙药七味清肝散化学成分组成,运用网络药理学探讨其关键靶点和相关通路,并通过实验进一步明确其抗肝纤维化的作用机制。方法 对蒙药七味清肝散进行UHPLC-TOF-MS测定及成分分析;在Swiss Target Prediction数据库筛选出蒙药七味清肝散相关靶点;在治疗靶点数据库 TTD 和 GeneCards 数据库筛选出肝纤维化相关靶点;通过Venny.2.1.0取交集获得蒙药七味清肝散抗肝纤维化靶点,通过STRING数据库进行蛋白互作分析,在Metascape平台进行GO功能和KEGG通路分析,运用AutoDock软件对核心靶点和活性成分进行分子对接验证;通过动物模型实验和离体细胞实验验证蒙药七味清肝散抗肝纤维化的作用机制。结果 共鉴定出化学成分45个,包括黄酮类、生物碱、香豆素、萜类、酚类、脂肪酸等。通过网络药理学分析,获得蒙药七味清肝散抗肝纤维化靶点62个,其中核心靶点10个。GO富集分析共涉及生物过程(BP)、细胞组分(CC)、分子功能(MF)三个方面。KEGG富集结果显示,PI3K/Akt、Rap1 、MAPK、AMPK、PPAR等是参与肝纤维化发生发展的通路。通过分子对接验证了活性成分 Quercetin、Luteolin、Kaempferol 分别与Akt1、PIK3R1、MAPK1紧密结合。在动物模型实验中,通过Masson染色观察出蒙药七味清肝散给药组可以使纤维组织增生减少,炎症细胞浸润减少,使纤维化的肝脏组织得到改善。Western blotting结果提示,蒙药七味清肝散可以使肝纤维化标志因子α-SMA、Collagen1(P<0.01)和PI3K、Akt蛋白表达量下降(P<0.01);在离体细胞实验中,蒙药七味清肝散含药血清可以导致HSC-T6凋亡率增加。结论 蒙药清肝散通过多成分、多靶点、多通路的形式发挥抗肝纤维化的作用,作用机制可能参与调控PI3K、Akt等关键靶点,参与调控细胞凋亡和能量代谢。
张春艳, 颜羽昕, 高晓阳, 马月宏. 蒙药七味清肝散抗肝纤维化的作用机制:基于UHPLC-TOF-MS和网络药理学方法[J]. 南方医科大学学报, 2021, 41(8): 1131-1141.
ZHANG Chunyan, YAN Yuxin, GAO Xiaoyang, MA Yuehong. Therapeutic mechanism of the Mongolian medicine Qiwei Qinggan Powder against liver fibrosis based on UHPLC-TOF-MS combined with network pharmacological methods[J]. Journal of Southern Medical University, 2021, 41(8): 1131-1141.