摘要: 目的探讨p53 靶向小分子RITA,替莫唑胺(TMZ)以及二者联用对人脑胶质瘤细胞U87 的增殖、克隆形成和凋亡等的 影响及其可能机制。方法采用MTS法分别检测0、1、5、10、20 μmol/L 的RITA、TMZ和半剂量的RITA+TMZ作用于U87 细 胞0、24、48、72 h 的细胞增殖情况,计算增殖率和抑制率,金正均法进行药物联用效果评价;qRT-PCR法和蛋白质印迹法分别 检测p53 和p21 等肿瘤凋亡相关基因的mRNA和蛋白质表达水平;流式细胞术Annexin V/PI 双染色法检测细胞凋亡;结晶紫 染色检测细胞克隆形成。结果MTS结果显示,RITA对U87 细胞抑制作用明显,且显著强于TMZ(72 h,4 个浓度对比P= 0.000),1~20 μmol/L 的RITA、TMZ作用72h 抑制率分别为25.94%~41.38%、3.84%~8.20%;二者联用细胞抑制率高于RITA (P<0.01)、TMZ单用(P=0.000),抑制率为29.21%~52.11%,抑制作用更显著。金正均法计算q 值,半剂量RITA和TMZ联合 给药48 h 后,浓度高于5 μmol/L 时q 值均大于1.2,药物联用表现为协同效应;RITA和TMZ均能促进p53,p21 和puma等凋亡 相关基因的表达,促进细胞凋亡,抑制细胞生长和克隆形成,且效果为RITA+TMZ>单用RITA>单用TMZ。结论RITA可通 过上调p53 的表达发挥抑癌作用并提高人脑胶质瘤细胞对TMZ的敏感性,使二者联用具有明显的协同作用。本研究为进 一步深入探索RITA在脑胶质瘤治疗中的应用及与TMZ联用后药效提高机制提供了参考。