南方医科大学学报 ›› 2020, Vol. 40 ›› Issue (03): 361-369.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2020.03.11
张浩轩,余 芸,蔡伟伟,卢华秋,何 锐,张仁豪,裴飞隆,王小蝶,方旖旎,魏 芳
摘要: 目的 探究miR129在氯喹增强顺铂促鼻咽癌细胞HNE1凋亡的作用及机制。方法 实验分为空白对照组、氯喹组、顺铂组、氯喹+顺铂组。MTT法观察HNE1细胞存活率;结晶紫染色法观察HNE1细胞集落克隆形成;采用HNE1细胞接种BALB/C 裸鼠建立移植瘤模型,随机分为4组,6只/组,3 d给药1次,连续用药4周,观察各组肿瘤生长情况;q-PCR检测HNE1细胞中miR129表达;质粒转染下调HNE1细胞miR129的表达;Western blot 法检测自噬相关蛋白p62、LC3B、Beclin1和耐药蛋白P-gp的表达;Annexin V/PI双染法,检测细胞凋亡率。结果 体内外实验结果均显示氯喹+顺铂较顺铂单用能显著抑制肿瘤的生长(P<0.01)。体外实验表明,下调抑癌基因miR129能显著促进HNE1细胞自噬、上调P-gp的表达(P<0.01);氯喹显著抑制顺铂诱导的HNE1细胞自噬,上调HNE1细胞中miR129的表达(P<0.01);转染抑制miR129后,氯喹抑制顺铂诱导HNE1细胞自噬的作 用被取消、氯喹和顺铂联合作用后HNE1细胞存活率显著增加(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论 氯喹通过上调miR129抑制HNE1细胞自噬和耐药,增强顺铂的促凋亡作用。