南方医科大学学报 ›› 2019, Vol. 39 ›› Issue (09): 1045-.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2019.09.07
李明翰,何友华,童国军,杨德鸿
摘要: 目的探讨连续泵入特立帕肽(TPTD)对去势和正常小鼠骨代谢的影响,为研究TPTD及其相关肽破骨作用的动物模型选 择提供实验依据。方法6周龄雌性C57BL小鼠24只,分别接受去势(OVX)或者假手术(SHAM),1周后用微量泵泵入TPTD或 者等量的溶剂(VEH),分成SHAM-VEH,SHAM-TPTD,OVX-VEH,OVX-TPTD四组。2周后,获取胫骨组织经显微CT测量胫 骨和皮质骨相关参数。并对胫骨组织行进行组织切片HE染色和TRAP染色,统计破骨细胞数目及生长板厚度。测量小鼠血清 中的钙离子浓度。取部分颅骨原代成骨细胞加雌二醇(E2)和TPTD刺激培养48 h后提取细胞总蛋白,分析β-catenin和RANKL 蛋白的表达。结果OVX小鼠的骨小梁骨量较SHAM小鼠的骨量显著减少(P<0.05)。TPTD泵入显著减低SHAM小鼠松质骨 骨量股骨中段皮质骨面积,与此相反,TPTD泵入增加OVX小鼠松质骨骨量,不改变皮质骨面积。TRAP染色结果发现,OVX较 SHAM小鼠胫骨骨松质破骨细胞明显增多,SHAM-TPTD较SHAM小鼠增多(P<0.05)。细胞学蛋白分析结果显示,E2 和 TPTD持续刺激48 h后,β-catenin表达量较TPTD单纯刺激降低,RANKL表达相对升高。结论TPTD的连续应用促进正常小鼠 的骨吸收,但对去势小鼠不具有明显的促骨吸收作用,去势小鼠不适用于研究TPTD及相关肽的促破骨作用。