南方医科大学学报 ›› 2019, Vol. 39 ›› Issue (06): 699-.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2019.06.11
柳红妙,周炜烽,廖晖,胡正阳,邹敏,刘叔文
摘要: 目的建立一种基于寨卡病毒包膜蛋白(Envelope protein, E)的非包被ELISA方法,检测被感染的细胞内E蛋白的表达情 况,用于抗寨卡病毒药物筛选。方法将寨卡病毒感染的贴壁细胞固定在孔板上,加入抗体与之结合,并确定抗体浓度,建立E 蛋白的非包被ELISA方法;用该方法检测木脂素类化合物C1的抗病毒活性;用实时荧光定量PCR实验(RT-PCR)验证这种非包 被ELISA方法的准确性;并排除该方法对登革病毒的交叉反应。结果经过优化,未感染的细胞的背景OD450降低到0.20左右, 采用该方法检测的抗病毒活性结果,与实时荧光定量PCR实验的结果基本一致,且该方法对登革病毒不存在交叉反应。结论 建立了一种寨卡病毒E蛋白的非包被ELISA方法,可用于抗寨卡病毒药物筛选。