南方医科大学学报 ›› 2019, Vol. 39 ›› Issue (06): 672-.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2019.06.07
于冬冬,赵丹阳,杨鸫祥,杨关林
摘要: 目的探索辛伐他汀(SIM)调节破骨细胞凋亡机制的实验研究。方法细胞分A组(Control 组)、B组(sRANKL+M-CSF 组)、C组(SIM+sRANKL+M-CSF组)、D组(VIVIT peptide+sRANKL+M-CSF组)、E组(SIM+VIVIT peptide+sRANKL+ M-CSF 组);WST-1 检测不同浓度的辛伐他汀对破骨细胞增殖活性影响;流式细胞仪检测SIM 及加入NFATc1 通路抑制剂VIVIT peptide后对破骨细胞凋亡的影响;免疫荧光检测NFATc1向细胞核的转位情况;Western blot检测SIM对细胞核内NFATc1磷酸 化的影响。结果WST-1 显示,与对照组相比,SIM(10-6mol/L)作用24 h、48 h 明显抑制破骨细胞的增殖活性(P=0.039<0.05, P=0.022<0.05)。与对照组相比,SIM 处理后破骨细胞G0/G1 期受到抑制(P=0.041<0.05),SIM 增加了Sub-G1 期的细胞数 (P=0.028<0.05)。倒置显微镜显示SIM促进破骨细胞凋亡,凋亡的细胞漂浮于培养基中。细胞核的DAPI染色和流式细胞仪检 测结果显示SIM促进破骨细胞凋亡(P=0.002<0.01),VIVIT peptide单独处理组(P=0.015<0.05),或SIM+VIVIT peptide组的细 胞凋亡数与SIM 组相似(P=0.08>0.05)。免疫荧光显示SIM 抑制NFATc1 的细胞核内转位,免疫印迹结果显示,SIM 抑制 NFATc1通路蛋白的磷酸化(P=0.013<0.05)。结论SIM通过NFATc1信号通路促进破骨细胞凋亡。