摘要: 目的检测阿帕替尼对结肠癌HCT-116细胞的抑制作用,探讨其可能的作用机制及其影响的信号通路。方法MTT方法 检测不同浓度(0、0.5、1、1.5、2 μmol/L)的阿帕替尼对结肠癌HCT-116 细胞的毒性作用,并设置卡培他滨阳性对照组;Annexin V-FITC/PI 双染法检测上述不同浓度的阿帕替尼处理后结肠癌HCT-116 细胞的凋亡情况,实时荧光定量PCR 及Western Blotting技术检测其对凋亡相关基因及蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3的影响,Western blotting技术检测其对Akt、p-Akt、Erk1/2和 p-Erk1/2 蛋白表达的影响。结果MTT细胞毒性检测结果表明,阿帕替尼在体外能有效抑制HCT-116 细胞的增殖,IC50 为 1.335 μmol/L。Annexin-V/PI双染法细胞凋亡检测结果表明,阿帕替尼能显著的诱导HCT-116细胞凋亡,并且呈浓度依赖性。 实时荧光定量PCR和Western blotting 结果表明,阿帕替尼可以诱导促凋亡基因Bax和Caspase-3 的表达,并抑制抗凋亡基因 Bcl-2的表达。Western blotting检测信号通路蛋白的结果表明,在阿帕替尼处理后p-Akt 和p-Erk1/2的表达显著降低,而Akt和 Erk总蛋白水平没有变化。结论阿帕替尼可通过抑制MAPK/Erk、PI3K/Akt信号转导通路来实现诱导细胞凋亡,从而达到抑制 HCT-116细胞增殖的目的。