摘要: 摘要:目的研究不同胰腺癌细胞株对神经生长因子(NGF)刺激的反应性,以及各细胞株中Trk-A的表达情况,探讨NGF对胰腺
癌细胞株作用的分子机制。方法选取MIA-PaCa-2、PANC-1、SW-1990、AsPC-1、BxPC-3等5种不同转移性能及分化程度的胰
腺癌细胞株,给予外源性NGF刺激,运用MTT方法观察各种细胞株的增殖情况;通过Matrigel实验观察NGF对细胞侵袭性的影
响。运用PCR及Western blotting检测各种细胞株中Trk-A的表达情况,并观察NGF刺激作用与细胞TrK-A表达之间的关系。
结果用含有不同浓度NGF的培养液(0、4、20、100、500 ng/ml)对5种细胞进行培养及MTT检测,发现NGF浓度为100 ng/ml对
细胞的刺激作用最强。选用含100 ng/ml NGF的培养液对各组胰腺癌细胞进行培养及MTT检测,结果显示NGF对PANC-1细
胞的刺激作用最大,增殖最快,对AsPC-1的刺激作用最小。Matrigel实验显示NGF可明显增加PANC-1及MIA-PaCa-2细胞的
侵袭能力,对AsPC-1细胞影响最小。TrK-A抑制剂CEP701可抑制NGF对细胞侵袭的刺激功能。对细胞中TrK-A基因表达及
蛋白水平检测显示,PANC-1细胞Trk-A水平最高,AsPC-1细胞水平最低。细胞内TrK-A表达水平与NGF对细胞增殖及侵袭的
影响成正相关。结论外源性NGF促胰腺癌细胞增殖与侵袭作用和细胞中Trk-A基因及蛋白表达水平一致,说明NGF对胰腺
癌的作用机制可能是通过与Trk-A蛋白结合而促进胰腺癌细胞的增殖及转移。