摘要： 摘要：目的明确萎缩性骨不连组织水平表达上调的hsa-miR-654-5p在人骨髓基质干细胞（hBMSCs）中对其预测靶基因骨形态
发生蛋白2（BMP2）mRNA和蛋白的抑制作用，探索其在成骨分化过程中的生物学调控功能。方法分离培养hBMSCs，将第4
代hBMSCs培养16 h 后分别按相应体系转染细胞，再培养48 h 后取六孔板内细胞提取总RNA和总蛋白，进行实时定量PCR
（qRT-PCR）和Western blotting，取24 孔板内细胞进行双荧光素酶报告基因检测。结果当hBMSCs中hsa-miR-654-5p 过表达
时，BMP2 的mRNA 和蛋白表达水平均发生明显下调；双荧光素酶报告基因检测提示，BMP2 的预测靶位点直接受
hsa-miR-654-5p的抑制调控，该靶位点被突变后hsa-miR-654-5p对BMP2的抑制作用消失。结论hsa-miR-654-5p可通过作用于
BMP2的特定靶位点而直接抑制BMP2的mRNA和蛋白表达。hsa-miR-654-5p的变化在成骨分化调控过程中具有重要作用。