南方医科大学学报 ›› 2023, Vol. 43 ›› Issue (12): 1998-2005.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2023.12.02
阮红良,佘冬梅,孙绍裘
RUAN Hongliang, SHE Dongmei, SUN Shaoqiu
摘要: 目的 基于表观遗传信号分子-溴结构域蛋白4(BRD4)表达探讨六味地黄丸治疗绝经后骨质疏松症(PMOP)及疲劳疗效的可能作用机制。方法 通过双侧卵巢摘除法制备PMOP大鼠模型;将大鼠随机分为假手术组、模型组(生理盐水,10 mL/kg)、中药组(六味地黄丸385.7 mg/kg),15只/组。中药组治疗12周后取股骨标本检测股骨密度强度以及骨组织BRD4蛋白的表达。检测各组鼠模型负重力竭游泳时间;酶联免疫吸附法测定鼠血清环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP)。原代培养成骨细胞,免疫荧光染色方法检测BRD4,MAPK和NF-κB蛋白的表达。结果 Western blot检测结果发现,与假手术组相比较,模型组BRD4蛋白表达水平上调(P<0.05);与模型大鼠相比较,中药组BRD4蛋白表达水平下调;鼠负重力竭游泳实验发现,中药组明显改善疲劳(P<0.05)。成骨细胞免疫荧光染色方法检测显示,中药组BRD4,MAPK和NF-κB蛋白表达减少。GSE56116数据集分析发现,肾阴虚组BRD4表达明显高于肾阳虚组和非肾虚组(P<0.05)。BRD4表达上调涉及神经配体受体反应、细胞骨架重排及细胞因子相互作用、粒细胞集落刺激因子趋化性等信号通路。结论 六味地黄丸可以减轻PMOP及疲劳表现,可能与BRD4表达减少以及BRD4介导的信号通路有关;BRD4有望成为PMOP潜在治疗靶点。