摘要: 目的探讨TGF-β1诱导的肿瘤细胞中CSRNP1/AXUD1基因的表达及其调控机制。方法分别用不同浓度的TGF-β1或
相同浓度下不同处理时间处理指数生长期的人肺腺癌细胞A549和人前列腺癌细胞PC-3,荧光定量RT-PCR检测TGF-β1对两
种肿瘤细胞中半胱氨酸-丝氨酸蛋白(cystein-serine-rich nuclear protein, CSRNP1)基因表达的剂量和时间依赖性效应;培养的
A549细胞血清饥饿后,分别在有无TGF-β1(20 ng/ml)和环己亚胺(30 μg/ml)作用下处理24 h,检测TGF-β1诱导的CSRNP1基
因的表达是否需要新蛋白的合成;最后,分别将SMAD3表达质粒flag-SMAD3和显性失活突变体表达质粒(flag-SMAD3-mu
转染A549细胞中,并以空质粒pcDNA3.1作为对照。血清饥饿后,进行有无TGF-β1(20 ng/ml)处理24 h,Western blot 确定外
源性SMAD3的过表达,荧光定量RT-PCR检测SMAD3的过表达对TGF-β1诱导的CSRNP1基因表达的影响。结果TGF-β1以
浓度和时间依赖的方式诱导肿瘤细胞中CSRNP1 基因的表达,并需要新的蛋白合成。SMAD3 的过表达增加TGF-β1 诱导的
CSRNP1的表达,而显性失活的SMAD3突变体(SMAD3-mu)的过表达则显著降低TGF-β1诱导的CSRNP1的表达。结论肿瘤
细胞中TGF-β1可能通过激活SMAD3 及其下游信号通路而诱导CSRNP1基因的表达。