南方医科大学学报 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (06): 817-.

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荧光定量PCR和环介导等温扩增方法检测隐球菌CAP10基因的比较研究

韩慧,胡子有,吴炳义   

  • 出版日期:2012-06-20 发布日期:2012-06-20

  • Online:2012-06-20 Published:2012-06-20

摘要: 摘要:目的建立荧光定量PCR和环介导等温扩增技术(LAMP)检测隐球菌荚膜相关蛋白基因(CAP10)的方法,并比较和评价两
种方法的优缺点。方法针对新型隐球菌CAP10基因序列,使用在线软件设计引物,并构建质粒标准品,优化反应条件后用荧光
定量PCR和LAMP两种方法检测定量的质粒,分析其敏感性和特异性,并检测临床标本。结果荧光定量PCR检测CAP10质粒
的敏感性为6.8×101拷贝,LAMP方法的敏感性为6.8×103拷贝,PCR检测阳性率比LAMP方法高。两种方法特异性好,对脑膜炎
奈瑟菌、白色念珠菌、热带念珠菌、黄曲霉、黑曲霉和大肠埃希菌的检测结果均为阴性。结论成功建立了检测CAP10基因的荧
光定量PCR方法敏感性和特异性高,但是需要特殊仪器;LAMP方法敏感性较低,但其操作简单,无需特殊仪器和设备,加入核
酸染料即能观察结果。两者均适用于新型隐球菌感染的检测。