南方医科大学学报 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (06): 772-.

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快速高效植物瞬时表达的实验室烟草无土栽培体系的构建

莫倩珍,麦荣嘉,杨志晓,陈敏芳,杨铁钊,赖华芳,杨培梁,陈强,周晓红   

  • 出版日期:2012-06-20 发布日期:2012-06-20

  • Online:2012-06-20 Published:2012-06-20

摘要: 摘要:目的构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系。方法优化烟草的无土栽培条件,基于
Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达
绿色荧光蛋白(GFP)的影响,以Western blot 和ELISA 分析GFP 表达情况。结果烟草无土培育的最佳条件为:光照强度
9000LX/层,光照时间16 h/d,日/夜温度28/21 ℃,相对湿度80%。侵染工程菌的最佳D600为0.8;叶片采收最佳时间为侵染后4 d;
本明烟和豫烟5号最佳侵染时机分别为第6周和第5周;工程菌pBYGFPDsRed.R/LBA4404侵染的本明烟和豫烟5号均能高效
表达GFP;豫烟5号的平均生物量高于本明烟。结论基于人工气候箱成功构建了实验室烟草无土栽培体系,并可实现GFP在本
明烟和豫烟5号的快速高效表达。