南方医科大学学报 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (05): 742-.

• • 上一篇    下一篇

西尼罗河病毒preM/EⅢ融合蛋白特异性单克隆抗体的制备以及应用分析

李林海,陈丽丹,廖杨,陈建芸,石玉玲   

  • 出版日期:2012-05-20 发布日期:2012-05-20

  • Online:2012-05-20 Published:2012-05-20

摘要: 摘要:目的制备针对西尼罗河病毒preM/EⅢ融合蛋白特异性单克隆抗体,并分析其在临床检测中的应用价值。方法采用原核
表达系统表达西尼罗河病毒preM/E 融合蛋白,作为抗原,免疫BALB/c小鼠,按常规单克隆抗体技术将免疫后小鼠脾细胞与
SP2/0 细胞融合,采用有限稀释法筛选能稳定分泌抗preM/EⅢ单抗的杂交瘤细胞株。接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,抽取腹水纯
化单克隆抗体。采用间接ELISA和Western blotting对抗体特异性和效价进行分析,并对临床样本进行检测。结果获得了1株
能稳定分泌preM/EⅢ蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为ME1。纯化后抗体效价为10-6,其亚类为IgG1。ME1单抗能与
西尼罗病毒preM/EⅢ蛋白以及西尼罗病毒发生特异性反应,而与日本脑炎病毒(JEV)、圣路易斯脑炎病毒(SLEV)、黄热病毒
(YFV)和登革热病毒(DENV)无交叉反应。临床诊断准确率为97.78%。结论ME1单克隆抗体具有较高的特异性,临床诊断准
确性较高,具有临床应用价值。