南方医科大学学报 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (04): 580-.

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海马胆碱能神经刺激肽通过活化3型毒蕈碱受体促进INS-1细胞胰岛素释放

高飞,陈宏,张桦,郭南京,徐艳花,蔡德鸿   

  • 出版日期:2012-04-20 发布日期:2012-04-20

  • Online:2012-04-20 Published:2012-04-20

摘要: 摘要:目的明确海马胆碱能神经刺激肽(HCNP)对INS-1细胞胰岛素分泌影响,并对其可能作用的毒蕈碱样胆碱能受体途径进
行分析。方法INS-1细胞随机分为3组:对照组、HCNP组、HCNP+佛波酯(PMA)组。对照组给予RPMI 1640液培养,HCNP组
给予人工合成HCNP(50 pg/ml)与RPMI 1640液共培养,HCNP+PMA组予人工合成HCNP与RPMI 1640液共培养后,行胰岛素
释放前18 h加入PMA(10 nmol/L);应用放射免疫方法检测各组不同浓度葡萄糖培养液中胰岛素含量。实时定量PCR检测对
照组、HCNP 组HCNP 前体蛋白(HCNP-pp)、胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase, ChAT)、3 型毒蕈碱样受体(3-type
muscarinic receptor, M3R)基因水平表达情况。结果浓度为3.3 mmol/L 葡萄糖,三组间胰岛素含量无明显差异。浓度为5.6
mmol/L、16.7 mmol/L葡萄糖作用下,HCNP组胰岛素含量均高于对照、HCNP+PMA组,差异具有统计学意义。HCNP组INS-1
细胞HCNP-pp、ChAT、M3R三者mRNA含量均高于对照组,差异具有统计学意义。结论HCNP通过提高ChAT活性,推测影响
乙酰胆碱合成,进一步活化M3R,促进胰岛素分泌,PMA可阻断此作用。