摘要： 摘要：目的探讨雷帕霉素及3-甲基腺嘌呤（3-MA）对高糖诱导的原代大鼠系膜细胞自噬、氧化损伤及衰老的影响。方法从大
鼠肾分离培养原代肾小球系膜细胞（GMCs），分为正常对照组、高糖组、高糖+雷帕霉素（自噬增强剂）及高糖+3-甲基腺嘌呤（自
噬抑制剂）干预组。在细胞培养24 h、72 h及10 d时，Western blotting观测自噬标志物-自噬相关基因LC3及泛素结合蛋白p62/
SQSTMI的表达变化；硫代巴比妥酸法检测细胞脂质损伤产物-丙二醛（MDA）水平，2,4-二硝基苯肼（DNPH）比色法测定细胞蛋
白质损伤产物-羰基含量，通过进行衰老相关β-半乳糖苷酶活性（SA-β-gal）染色及衰老相关异染色质斑块（SAHF）分析检测细胞
的衰老程度。结果与对照组相比，细胞经高糖处理72 h和10 d后，自噬标志物LC3表达降低，p62/SQSTMI升高，MDA及羰基
含量上升（均P<0.05）；处理72 h细胞SA-β-gal染色阳性率增加（P<0.05），细胞核异染色质斑块形成增加。高糖培养的细胞用雷
帕霉素干预72 h 和10 d 后，LC3 表达升高，p62/SQSTMI表达下降，MDA及蛋白质羰基含量均下降（均P<0.05），72 h 后细胞
SA-β-gal染色阳性率下降（P<0.05），细胞核异染色质斑块形成减少；高糖培养的细胞用3-MA干预72 h和10 d后，LC3表达下
降，p62/SQSTMI表达升高，MDA及蛋白质羰基含量升高（均P<0.05），72 h细胞SA-β-gal染色阳性率上升（P<0.05），细胞核斑块
形成增多。结论高糖可抑制系膜细胞自噬功能，促进系膜细胞氧化损伤，加速细胞衰老；雷帕霉素干预可减轻高糖对系膜细胞
自噬功能抑制，减少氧化损伤，延缓衰老；3-MA加重高糖对系膜细胞自噬功能的抑制，进一步加重细胞氧化损伤，加速衰老。