摘要： 摘要：目的构建含有全长肠癌转移相关基因( MACC1) 的表达载体，建立稳定表达MACC1 的胃癌BGC-823/
pBaBb-puro-MACC1细胞系，通过基因芯片技术筛选出转染MACC1后胃癌细胞株的差异表达基因，探讨MACC1基因与差异
基因之间可能的调节机制或信号通路。方法以人胚肾293FT细胞为模板，经PCR扩增获全长MACC1 cDNA序列，将目的基
因序列克隆入带有绿色荧光蛋白报告基因的pBaBb-puro表达载体，建立pBaBb-puro-MACC1表达载体。经限制性内切酶酶切
鉴定、测序并转染293FT细胞观察报告基因表达情况判断是否构建成功。构建成功后的pBaBb-puro-MACC1表达载体转染人
胃癌BGC-823细胞，建立稳定表达MACC1的BGC-823/pBaBb-puro-MACC1细胞。qRT-PCR及western blot检测转染细胞的
MACC1基因表达，应用基因芯片技术筛选出转染MACC1基因后胃癌细胞株的差异表达基因并对其探讨研究。结果成功扩
增全长MACC1cDNA，经测序鉴定序列完全正确；转染293FT细胞可见清晰的绿色荧光表达。BGC-823/pBaBb-puro-MACC1
细胞能够稳定表达MACC1。基因芯片筛选出差异基因发现上调基因33个，下调基因24个，这些差异表达基因的功能涉及多个
方面。结论成功构建了含有全长MACC1cDNA的表达载体系统，建立了稳定表达MACC1的BGC-823/pBaBb-puro-MACC1
细胞，通过对差异基因的分析发现MACC1 可能引起胃癌细胞株BGC-823 基因表达谱中一些非常重要的分子的改变，为
MACC1基因进一步研究奠定了良好基础。