南方医科大学学报 ›› 2012, Vol. 32 ›› Issue (02): 239-.

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C反应蛋白对人外周血来源内皮祖细胞Notch信号通路表达影响的实验研究

陈爱华,何非,程婧,刘福林,宋旭东,郭敬宾   

  • 出版日期:2012-02-20 发布日期:2012-02-20

  • Online:2012-02-20 Published:2012-02-20

摘要: 摘要:目的观察C反应蛋白(CRP)对内皮祖细胞(EPC)中Notch信号通路表达的影响。方法密度梯度离心法获取人外周血单个
核细胞并培养,FITC-荆豆凝集素I、DiI-乙酰化低密度脂蛋白荧光双染进行鉴定。取生长7~14 d EPC,分为对照组、10 和
20 mg/L CRP干预组,培养48 h后分别采用四氮唑溴盐比色法、改良的Boyden小室和黏附能力检测各组EPC增殖、迁移和粘附
能力。采用RT-PCR 检测不同浓度CRP 对EPC 中Notch 信号通路mRNA的影响,Western blot 检测各组Notch-1 及其配体
Jagged-1 的蛋白基因表达。结果外周血分离获取的单个核细胞经体外培养后形成了典型的EPC集落,经荧光双染证实为
EPC。CRP(10、20 mg/L)组EPC数量分别为(61±3)、(54±3)个,对照组EPC数量为(71±4)个。CRP各组EPC在490 nm吸光度值
分别为0.287±0.046、0.211±0.042,对照组为0.386±0.044。与对照组相比,CRP各组EPC黏附数量和迁移数量均显著减少(P<
0.05)。CRP处理48 h 后EPC中Jagged-1 和Notch-1 mRNA含量明显增加,其中10 和20 mg/L组Jagged-1 mRNA分别升高了
3.84 和10.70 倍,Notch-1 mRNA 分别升高了2.97 和3.58 倍;差异均具有统计学意义(P<0.05)。10 和20 mg/L CRP 处理组
Jagged-1和Notch-1蛋白表达均高于对照组(P<0.05)。结论CRP处理后EPC的Notch信号通路表达发生了显著的改变,提示该
通路可能是CRP影响EPC生物学功能的机制之一。