摘要: 摘要:目的构建HNF6的慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系并观察HNF6对大肠癌细胞
系SW620的侵袭转移能力的影响。方法构建HNF6慢病毒载体pLeno-DCE-HA-HNF6,感染293T细胞,收集上清测定病毒滴
度;病毒颗粒转染SW620细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪观察转染效率;定量PCR(qPCR)及Western blotting检测HNF6的
表达;应用Transwell 和划痕试验观察SW620 细胞侵袭转移能力的变化。结果通过PCR及酶切鉴定成功构建pLeno-DCEHA-
HNF6载体;包装并得到高滴度的病毒颗粒;转染SW620后,qPCR 及Western blotting检测到HNF6表达明显升高;HNF6导
致SW620 明显的细胞形态变化,Transwell 及划痕试验证明HNF6 使SW620 细胞迁移能力降低。结论成功构建并包装得到
HNF6的慢病毒颗粒,建立稳定表达HNF6的大肠癌细胞系SW620-HNF6,证明过表达HNF6后可以抑制大肠癌侵袭转移能力。