摘要： 摘要：目的探讨microRNA-221（MIR221）对结肠癌细胞中CDKN1C/p57表达调控及细胞增殖的影响。方法常规培养人
结肠癌Caco2 细胞系，预先给予或不给予CDKN1C/p57 干扰性小RNA（anti-p57-siRNA）处理，再以脂质体分别转染
MIR221前体（pre-MIR221）或MIR221特异性抑制剂（anti-MIR221）寡核苷酸，应用实时荧光定量PCR（Real-time RT-PCR）
检测Caco2细胞中MIR221表达状况，运用半定量RT-PCR及Western-blot分析CDKN1C/p57 mRNA及蛋白表达状况，并通
过噻唑蓝（MTT）比色法观察细胞的增殖状态；构建pGL3-p57荧光素酶报告载体并与pre-MIR221或anti-MIR221共转染
Caco2细胞，检测转染细胞中荧光素酶活性变化。结果Caco2细胞转染pre-MIR221后，CDKN1C/p57蛋白表达水平下降，
细胞增殖显著（P<0.01）；而anti-MIR221 可上调CDKN1C/p57 蛋白表达继而抑制细胞增殖，且此种抑制作用可被
anti-p57-siRNA逆转，说明此种抑制效应确由CDKN1C/p57所介导；在转染重组有CDKN1C/p57基因3’-UTR片段的荧光
素酶报告载体的Caco2细胞中，共转染pre-MIR221后荧光素酶活性下降，而共转染anti-MIR221后荧光素酶活性增高，差异
均具有统计学意义（P<0.01）。结论MIR221可通过与CDKN1C/p57 mRNA 3’-UTR区域结合使结肠癌细胞中CDKN1C/
p57蛋白表达下降而促进肿瘤增殖；anti-MIR221则可通过上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖而发挥抗瘤效应。