摘要： 摘要：目的克隆并表达肠道病毒71型VP1~VP4蛋白基因，初步鉴定其免疫原性。方法抽提病毒RNA，经RT-PCR方法
分别扩增出VP1~VP4蛋白基因片段，经克隆后，在QIA表达系统中表达，表达产物用8 mol/L尿素洗涤及Ni柱亲和层析
纯化后，用肠道病毒71型免疫兔血清和柯萨奇病毒A16型免疫兔血清对重组蛋白进行Western blotting及ELISA鉴定。
结果构建的重组质粒pQE30a/ VP1~VP4经IPTG诱导，重组蛋白VP1~VP4高效表达并纯化成功，经Western blotting及
ELISA证实重组蛋白VP1~VP4可以被免疫兔血清特异识别。结论肠道病毒71型VP1~VP4蛋白表达载体在大肠杆菌
M15中高效表达。纯化产物具有较强的免疫原性，为今后EV71亚单位疫苗的研究和检测试剂盒提供了参考。