摘要： 摘要：目的克隆表达沙眼衣原体pORF8质粒蛋白，并在衣原体感染细胞中对其进行定位分析。方法PCR法扩增pORF8
基因，并将其定向插入pGEX-6p载体构建原核表达重组体pGEX-6p/pORF8，重组体转化E.coli XL1Blue后经IPTG诱导
表达pORF8融合蛋白，融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫Balb/C鼠，制备pORF8多克隆抗体；应用
免疫荧光试验对pORF8质粒蛋白进行定位。结果pORF8基因全长为744 bp，编码247个氨基酸残基，pGEX-6p/pORF8
在大肠杆菌中表达相对分子质量约为54 000的GST-pORF8融合蛋白，间接免疫荧光实验结果显示pORF8在感染细胞中
的表达模式与主要外膜蛋白基本一致，而与衣原体蛋白酶样活性因子分布模式不同。结论pORF8质粒蛋白定位于衣原
体菌体上，为衣原体菌体蛋白。该研究为进一步研究该蛋白的结构功能、阐明Ct的致病机制奠定了基础。