南方医科大学学报 ›› 2011, Vol. 31 ›› Issue (10): 1742-.

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靶向沉默p65 基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响

王玲,单保恩,桑梅香,连易水,王彬,丁春艳   

  • 出版日期:2011-10-20 发布日期:2011-10-20

  • Online:2011-10-20 Published:2011-10-20

摘要: 摘要:目的利用miRNA靶向沉默p65基因,观察其对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖及凋亡的影响。方法以脂质体
LipofectamineTM2000为载体,将针对特异靶点p65基因的miRNA转染入MDA-MB-231细胞。RT-PCR和Western blot法
检测p65 mRNA和蛋白表达的变化;MTT法检测细胞增殖;流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡;Western blot法检测凋亡
相关因子表达的变化。结果RT-PCR和Western blot检测结果显示,p65miRNA转染组p65 mRNA及蛋白表达量较对照组
显著下降(P<0.05);MTT检测结果显示,沉默p65基因后,细胞出现了生长抑制现象;FCM检测结果发现,p65miRNA转
染组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。Western blot进一步检测发现,转染组细胞中caspase-3的前体蛋白条带变细,裂解片
段条带加深;PARP蛋白出现裂解片段。结论miRNA靶向沉默p65基因可抑制人乳腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,推测
p65基因可能成为乳腺癌基因治疗的一个新靶点。