摘要： 摘要：目的克隆猪IL-12 (pIL-12)p35和p40亚单位cDNA，构建含有重组猪单链IL-12(pscIL-12)融合基因的真核表达质
粒并进行表达。方法分别从正常成年肉猪的外周血单个核细胞(PBMCs)和脾淋巴细胞中提取总RNA，经RT-PCR分别
获得pIL-12 p35和p40亚单位编码序列的cDNA，应用重叠延伸PCR技术通过一柔性接头（linker）(Gly4Ser)3串联这两个亚
基构建融合基因pscIL-12，将融合基因pscIL-12插入pcDNA3.1(+)真核表达载体，通过阳离子聚合物介导转染CHO-K1细
胞进行表达，RT-PCR鉴定pscIL-12 融合基因在真核细胞中的表达。结果所克隆的pIL-12 p35亚基和p40亚基的编码基
因序列和构建的融合基因pscIL-12序列均经PCR、酶切、测序得以证实；融合基因pscIL-12在CHO-K1细胞中成功转录。
结论成功构建了pcDNA3.1(+)-pscIL-12融合基因的真核表达质粒；pcDNA3.1(+)-pscIL-12在CHO-K1细胞中成功转录，
为进一步探讨pscIL-12融合蛋白的生物学活性和疫苗佐剂效应奠定了基础。