南方医科大学学报 ›› 2011, Vol. 31 ›› Issue (07): 1183-.

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尘螨主要变应原蛋白的IgE结合表位序列分析

钟志美,郑传东,王方   

  • 出版日期:2011-07-20 发布日期:2011-07-20

  • Online:2011-07-20 Published:2011-07-20

摘要: 摘要:目的对屋尘螨主要变应原(Der p 1)蛋白分子中与过敏病人血清特异性IgE相结合的表位序列的鉴定。进而获得
基于串联表位的小分子低毒过敏原以作为新的免疫治疗剂。方法采用全蛋白序列重叠扫描法对Der p 1蛋白进行全表
位筛选,即合成了覆盖Der p 1全蛋白222个氨基酸的31段各含15个氨基酸的多肽,且相邻肽段间有8个氨基酸的重叠。
并将这些肽段按点状固相多肽合成法依顺序合成于纤维膜上。再将该膜与由数份过敏血清组成的血清池孵育,经抗人
IgE-HRP二抗结合及X光片显影后对阳性点进行灰度比对及分析。结果经对X光片阳性点的比对及分析,我们确定出
了Der p 1过敏原蛋白中的3个强阳性表位序列。它们是位于第85~99位的氨基酸序列(表位1,Ep1),第106~120位的氨
基酸序列(表位2,Ep2)及第190~204位的氨基酸序列(表位3,Ep3)。结论我们获得了Der p 1中3个15肽的线性IgE结
合表位(B细胞表位)序列。证实了Der p 1分子中存在IgE结合的线性表位。为进一步构建T/B细胞串联表位的小分子低
毒过敏原提供了物质基础。