南方医科大学学报 ›› 2011, Vol. 31 ›› Issue (07): 1179-.

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补体应答基因-32过表达对SW480细胞骨架的影响

田杰,徐川,杨敏慧,李祖国   

  • 出版日期:2011-07-20 发布日期:2011-07-20

  • Online:2011-07-20 Published:2011-07-20

摘要: 摘要:目的通过基因重组技术构建pcDNA3.0-RGC32重组质粒,并检测其对细胞骨架的影响。方法扩增RGC32的全长
并定向克隆到真核表达载体pcDNA3.0,获得重组质粒pcDNA3.0-RGC32,转染SW480 细胞,采用G418 筛选单克隆,
Western blot检测转染前后SW480细胞中RGC32的表达水平,并制作转染前后SW480细胞骨架标本,并采用划痕实验观
察细胞的迁移能力。结果pcDNA3.0-RGC32真核表达载体构建成功,转染重组载体后细胞中RGC32的表达量明显增
多。转染重组质粒前,SW480细胞骨架中微丝纤维束少而短、极性不明显;转染重组载体后的细胞微丝纤维束数量增多,变
长,有了明显的极性,并且可见细胞膜向前伸出丝状结构的伪足或者是片状结构的伪足,细胞骨架发生了重组,并且过表达
后细胞的迁移能力增强。结论通过过表达RGC32,促进细胞骨架重组,有利于细胞运动,推测细胞骨架重组是RGC32促
进肿瘤转移的重要机制。