摘要： 摘要：目的检测nestin基因在8种鼻咽癌细胞中的表达差异，寻找高表达的细胞株。构建nestin基因的shRNA表达载体，
建立nestin稳定干扰的鼻咽癌细胞株。方法应用Real-time PCR和免疫荧光技术检测nestin在鼻咽癌细胞株中的表达水
平。构建带GFP的重组靶向nestin shRNA慢病毒表达质粒，筛选阳性克隆，测序鉴定。293T细胞包装病毒，收集病毒上
清，测定滴度。经Real-time PCR内源筛靶，选择最佳靶点。将重组慢病毒感染5-8F细胞，Western blotting 和Real-time
PCR检测nestin的表达。结果在8种鼻咽癌细胞株中，5-8F细胞中nestin表达较高。PCR和测序验证重组质粒构建成
功。慢病毒感染5-8F细胞后，与阴性对照组和空白组相比，nestin的mRNA和蛋白水平明显受到抑制。结论成功构建了
干扰nestin的慢病毒重组质粒，并建立了稳定靶向干扰nestin表达的5-8F鼻咽癌细胞株。