南方医科大学学报 ›› 2006, Vol. 26 ›› Issue (11): 1543-1547.
肖新莉; 韩俊; 张琳; 陈岚; 张瑾; 陈新林; 周伟; 姜惠英; 张宝云; 刘勇; 董小平;
XIAO Xin-li1,HAN Jun2,ZHANG Lin3,CHEN Lan4,ZHANG Jin5,CHEN Xin-lin1,ZHOU Wei2,JIANG Hui-ying2,ZHANG Bao-yun2,LIU Yong1,DONG Xiao-ping21Institue of Neurobiology,School of Medicine,Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061,China;2National Institute for Viral Disease Control and Prevention
摘要: 目的克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断。方法经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Westernblotting和免疫组化鉴定。结果所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性。Westernblotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白。结论NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究。
中图分类号: