南方医科大学学报

南方医科大学学报 ›› 2006, Vol. 26 ›› Issue (04): 469-174.

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登革2型病毒NGC株基因组亚克隆的构建及其鉴定

贡树基； 曹虹； 赵卫； 张文炳； 周浩； 陈丽丹；   

  1. 南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病毒研究所； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 微生物学系； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 微生物学系 广东 广州 510515； 广东 广州 510515；
  • 出版日期:2006-04-20 发布日期:2006-04-20
  • 基金资助:
    广州市科技攻关计划重点项目(2004Z2-E0214);广东省自然科学基金(32833)~~

Construction and identification of genomic cDNA subclones of dengue 2 virus NGC strain

GONG Shu-ji, CAO Hong, ZHAO Wei, ZHANG Wen-bing, ZHOU Hao, CHEN Li-dan Department of Microbiology, Institute of Virology, School of Public Health and Tropical Medicine, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China   

  1. 南方医科大学公共卫生与热带医学学院微生物学系； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病毒研究所； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 微生物学系； 南方医科大学公共卫生与热带医学学院 微生物学系 广东 广州 510515； 广东 广州 510515；
  • Online:2006-04-20 Published:2006-04-20

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摘要： 目的构建登革2型病毒NGC株基因组全序列的亚cDNA克隆,为进一步构建全长感染性cDNA克隆奠定基础。方法根据登革2型病毒NGC株基因组全序列中的酶切位点设计2对引物,从病毒感染的乳鼠脑中提取RNA,采用长链RT-PCR技术扩增出覆盖病毒基因组全长的2个cDNA片段,并克隆至pCR-XL-TOPO载体后测序。结果经酶切鉴定和序列测定表明,获得的cDNA克隆为登革2型病毒NGC株特异的。结论已成功构建出登革2型病毒NGC株基因组的2个cDNA亚克隆。 

Abstract: Objective To construct the cDNA subclones spanning the entire genome of dengue 2 virus NGC strain for further construction of full-length infectious viral cDNA clone. Methods Two pairs of primers were designed according to the restriction endonuclease sites in the viral genome of dengue 2 virus NGC strain. After viral RNA extraction from the brain of infected new-born mice, two parts of full-length viral cDNA were amplified by long RT-PCR and cloned into the vector pCR-XL-TOPO. The partial sequence of the recombinant plasmid was determined. Results and Conclusion Sequence analysis and digestion with restriction enzymes demonstrated that the two cDNA subclones were specific for dengue 2 virus NGC strain, suggesting the successful construction of the two cDNA subclones of dengue 2 virus NGC strain. 

中图分类号: