南方医科大学学报 ›› 2006, Vol. 26 ›› Issue (03): 258-.
黄慧; 张成; 席静; 姚晓黎; 邱国光; 熊符;
HUANG Hui1,ZHANG Cheng1,XI Jing3,YAO Xiao-Li1,QIU Guo-Guang2,XIONG Fu1 1Neurology Department,2Expremental Animal Center,First Affiliated Hospital,Sun-Yat sen University,510080,China;3Laboratory for Neuromuscular Research,Massachusetts General Hospital East,Bldg 114,16th St,Charlestown,MA,USA 02129
摘要: 目的建立家族性肌萎缩侧索硬化症(FALS)转基因模型鼠的繁育方法,并对其子代鼠进行基因鉴定。方法(1)以6只B6SJL SOD1G93A/+半合子雄鼠与6只B6SJLF1/J+/+雌鼠(1∶1)交配;(2)由鼠尾血提取基因组DNA,PCR扩增hmSOD1基因的片段,电泳后观察结果;(3)对PCR产物进行纯化测序,并通过BLAST验证。结果6对种鼠交配产鼠仔53只,存活率为98%(52/53);G93A hmSOD1阳性鼠约占44.2%(23/52);PCR扩增产物分别为内对照(IL-2):324 bp;Tg(hmSOD1):236 bp;测序证实PCR产物的基因序列和hmSOD1基因片段中的序列一致,并存在G93A突变。结论B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J雄鼠与B6SJLF1/J雌鼠配种能成功繁育出Tg(hmSOD1)阳性的ALS半合子子代鼠;本实验的PCR法能准确鉴定hmSOD1基因阳性鼠,并证实该转入的基因按近似孟德尔方式遗传,为ALS实验研究奠定了基础。 更多还原
中图分类号: