南方医科大学学报 ›› 2006, Vol. 26 ›› Issue (02): 169-173.
管海涛; 薛兴欢; 王西京; 李昂; 秦兆寅;
GUAN Hai-tao, XUE Xing-huan, WANG Xi-jing, LI Ang, QIN Zhao-yin Department of Oncologic Surgery, Department of General Surgery, Second Hospital of Xi’an Jiaotong University;MedicaI Research Center, Stomatological Hospital of Xi’an Jiaotong University, Xi’an 710004, China
摘要: 目的采用RNA干扰技术(siRNA)阻断survivin基因的表达,观察其抑制胰腺癌细胞增殖及诱导胰腺癌细胞凋亡的作用。方法构建靶向survivin的siRNA质粒表达载体,采用LipofectamineTM2000转染胰腺癌细胞PC-2,采用半定量RT-PCR、免疫组化技术检测转染前后PC-2细胞survivin基因表达的变化;采用MTT法检测对PC-2细胞增殖的抑制作用;采用流式细胞术检测其诱导PC-2细胞凋亡的作用。结果靶向survivin的序列特异性的siRNA可以高效地抑制PC-2细胞survivin基因表达,在mRNA水平其表达抑制率为81.25%,在蛋白质水平其表达抑制率为74.24%。转染靶向survivin的siRNA质粒表达载体可以显著抑制PC-2细胞的增殖,细胞接种24、48 h后其增殖抑制率分别为 28.00%和33.38%;转染后24、48 h可以诱导8.46%、7.53%的细胞凋亡。结论所构建的靶向survivin的siRNA质粒表达载体可以有效地阻断PC-2细胞survivin基因表达,阻断survivin基因表达可以显著地抑制PC-2细胞的增殖并在一定程度上诱导其凋亡,靶向survivin的siRNA在胰腺癌的基因治疗中具有一定的价值。 更多
中图分类号: