南方医科大学学报 ›› 2006, Vol. 26 ›› Issue (02): 162-165.
危敏; 马文丽; 宋艳斌; 毛向明; 李凌; 郑文岭;
WEI Min, MA Wen-li, SONG Yan-bin, MAO Xiang-ming, LI Ling, ZHENG Wen-ling Institute of Molecular Biology, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China;South China Genomics Research Center, Guangzhou 510860, China
摘要: 目的应用限制性显示(RD)PCR技术筛选细胞松弛素B(Cytochalasin B,CB)诱导K562细胞脱核前后的差异基因,探讨CB诱导细胞脱核的分子机制。方法用CB(终浓度为10 μg/ml)处理K562细胞24 h,分别提取对照组和处理组细胞总RNA,将两组等量的细胞总RNA纯化为mRNA,反转录为cDNA,利用RD-PCR技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、筛选CB处理前后差异表达的基因。对筛选出的差异表达基因进行克隆、测序,在GenBank检索进行序列同源性分析。结果筛选及克隆了7个差异表达基因,其中水通道蛋白1(AQP1)基因经反转录PCR验证在CB诱导脱核的 K562细胞中表达上调。结论 AQP 1基因在CB诱导K562细胞脱核过程中特异性高表达,提示其可能与细胞脱核及增殖抑制密切相关。 更多还原
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