南方医科大学学报

南方医科大学学报 ›› 2005, Vol. 25 ›› Issue (03): 267-269.

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重组人血管内皮细胞生长因子工程菌高密度发酵工艺研究

胡志明, 马骊, 周明乾, 孟民杰, 杨介钻, 王小宁   

  1. 南方医科大学分子免疫学研究所, 广东, 广州, 510515
  • 出版日期:2005-03-20 发布日期:2005-03-20
  • 基金资助:
    收稿日期:2004-12-31。
    基金项目:广州市科技计划(2003Z2-E0171);广东省科技攻关计划(2004B31201010);军队医药卫生科研基金(04LX028)
    作者简介:胡志明(1966- ),男,南方医科大学在读博士生,电话:020-61648322,E-mail:hzm@fimmu.com;Correspondingauthor:WANGXiao-ning,Tel:020-61648322,E-mail:xnwang@21cn.net

High cell density fed-batch culture of E.coli expressing rhVEGF121

HU Zhi-ming, MA Li, ZHOU Ming-qian, MENG Min-jie, YANG Jie-zuan, WANG Xiao-ning   

  1. 南方医科大学分子免疫学研究所, 广东, 广州, 510515
  • Online:2005-03-20 Published:2005-03-20

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摘要： 目的 建立人血管内皮细胞生长因子(BL21/pET-24a/hVEGF121)工程菌的高密度发酵工艺。方法 采用发酵罐发酵,对影响工程菌生长及目的蛋白表达的因素如培养基、诱导时间及补料进行优化。结果 采用M9复合培养基、活化至对数生长期时诱导4 h以及以甘油为碳源连续流加补料的条件发酵,可使菌体量提高至68 g/L,rhVEGF121的表达量达菌体蛋白总量的23%。结论 该发酵工艺提高了工程菌的产量和rhVEGF121的表达水平。

Abstract: Objective To investigate the optimal high cell density fermentation conditions of recombinant E.coli BL21/pET- 24a/hVEGF,sub>121 expressing recombinant human vascular endothelial growth factor (rhVEGF121).Methods The effects of the composition of the fermentation medium, induction time and fed-batch carbon sources on the expression level of rhVEGF121 and cell output were analyzed.Results and Conclusion When cultured in modified M9 medium and induced for 4h in the presence of 0.5mmol/L IPTG at 37℃ with glycerol as the carbon sources by continuous fed-batch mode, the recombinant E.coli expressed rhVEGF121 at the level up to 23% of the total proteins and the yield reached 68g/L. The optimized fermentation condition for recombinant E.coli enables high expression level of rhVEGF121.

中图分类号: