南方医科大学学报

南方医科大学学报 ›› 2004, Vol. 24 ›› Issue (09): 991-994.

• • 上一篇    下一篇

内含子和5’非翻译区对人血小板生成素基因表达的影响

宁云山1, 李妍1, 周明乾2, 李明1, 曾溢滔3, 王小宁2   

  1. 1. 第一军医大学, 热带病研究所, 广东广州, 510515;
    2. 第一军医大学, 分子免疫研究所, 广东广州, 510515;
    3. 上海医学遗传研究所, 上海, 210009
  • 出版日期:2004-09-20 发布日期:2004-09-20
  • 基金资助:
    收稿日期:2004-3-15。
    基金项目:国家科委“1035”重大项目(96-901-009);广东省自然科学基金重点项目(963011)
    作者简介:宁云山(1968-),男,2001年毕业于第一军医大学,博士,副教授,电话:020-61648466,Email:UAC_ning@hotmail.com

Role of intron and 5’ untranslated region in human thrombopoietin gene expression

NING Yun-shan1, LI Yan1, ZHOU Ming-qian2, LI Ming1, ZENG Yi-tao3, WANG Xiao-ning2   

  1. 1. 第一军医大学, 热带病研究所, 广东广州, 510515;
    2. 第一军医大学, 分子免疫研究所, 广东广州, 510515;
    3. 上海医学遗传研究所, 上海, 210009
  • Online:2004-09-20 Published:2004-09-20

PDF

1177

摘要： 目的 观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5’非翻译区对TPO表达的影响。方法 分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO 真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量。结果 在转染48 h后,各类TPO重组质粒在cos-1细胞中表达顺序为:TPO intron v> TPOcDNA>ΔTPO intron I> TPO intron I> TPO gDNA。结论 在TPO基因组中,最后一个内含子可显著提高TPO的表达水平,表明其可能含有特殊的增强序列;同时进一步证实,在TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达的结构元件,造成TPO基因组在细胞中不表达或低水平表达。

Abstract: Objective To study the role of 5’ untranslated region (UTR) and intron in the expression of human thrombopoietin (TPO) gene. Methods A number of expression vectors containing TPO mini-gene fused to the regulatory elements of cytomegalovirus (CMV) were constructed and transfected via lipofectin into cultured cos-1 cells for transient expression of TPO gene. The cell culture media were analyzed with highly sensitive sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) 48 h after the transfection. Results The expression levels of the TPO gene elements followed the order of TPO intron v> TPOcDNA>ΔTPO intron I> TPO intron I> TPO gDNA in cos-1 cells. Conclusion The last intron of TPO gene obviously enhances the expression level of TPO gene, which can be inhibited by 5`UTR of TPO gene.

中图分类号: