南方医科大学学报 ›› 2023, Vol. 43 ›› Issue (5): 807-814.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2023.05.17
姜 勇,葛文婷,赵 莹,吴煜格,霍一鸣,潘岚婷,曹 爽
JIANG Yong, GE Wenting, ZHAO Ying, WU Yuge, HUO Yiming, PAN Lanting, CAO Shuang
摘要: 目的 探讨长链非编码RNA LINC00926对低氧诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)焦亡的调控作用及分子机制。方法 低氧(5% O2)处理HUVECs细胞体外模拟冠心病。实验将HUVECs细胞分为常氧对照组(Normal)、转染空载质粒组(OE-NC)、转染 LINC00926 过表达质粒组(OE-LINC00926)、低氧处理组(Hypoxia)、Hypoxia+OE-NC 对照组、Hypoxia+OE-LINC00926组、Hypoxia+si-Ctrl 对照组、Hypoxia+si-ELAVL1组、Hypoxia+si-ELAVL1+OE-LINC00926组。应用RT-qPCR及Western blot检测LINC00926和ELAVL1的表达情况。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,ELISA法检测炎性因子IL-1β水平,Western blot 检测焦亡相关蛋白 caspase1、cleaved-caspase1 和 NLRP3 的蛋白表达水平。应用 RIP 实验验证 LINC00926 与ELAVL1的结合情况。结果 与Normal组相比,低氧处理上调了HUVECs中LINC00926的mRNA表达和ELAVL1的蛋白表达(P<0.05),但不影响ELAVL1的mRNA表达。与Normal组相比,过表达LINC00926可抑制HUVECs细胞增殖(P<0.05),提高了HUVECs中炎性因子IL-1β水平(P<0.05)以及焦亡相关蛋白(caspase1、cleaved-caspase1和NLRP3)的表达(P<0.05)。在低氧处理的HUVECs中,过表达LINC00926可以进一步提高低氧处理上调的ELAVL1蛋白水平。RIP实验结果证实了LINC00926与ELAVL1蛋白的结合关系。在低氧诱导的HUVECs中,敲低ELAVL1可降低IL-1β水平和焦亡相关蛋白(caspase1、cleaved-caspase1、NLRP3)的表达(P<0.05),而LINC00926过表达可部分逆转敲低ELAVL1的影响。结论 在低氧处理的HUVECs中,LINC00926通过募集ELAVL1促进HUVECs细胞焦亡。