南方医科大学学报 ›› 2022, Vol. 42 ›› Issue (12): 1852-1857.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2022.12.14
张 舒,苏保林,王亮亮,汤水福,陈刚毅
ZHANG Shu, SU Baolin, WANG Liangliang, TANG Shuifu, CHEN Gangyi
摘要: 目的 探讨丹参酮IIA在防治脓毒血症急性肾损伤(AKI)方面的作用及潜在机制。方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组(10 mg/kg LPS等体积无菌生理盐水)、LPS组(10 mg/kg LPS作用24 h)、LPS+丹参酮IIA组(10 mg/kg 丹参酮IIA预处理15 min再给予10 mg/kg LPS作用24 h)(10只/组)。给药后检测小鼠血肌酐(Scr)、血尿素氮水平(BUN),PAS染色观察小鼠肾组织病理变化,Western blot检测小鼠肾组织RIP3、Cleaved-caspase3、p18-FUNDC1表达水平。将体外培养正常的人肾小管上皮细胞(HK-2)分为空白对照组、LPS 刺激组(LPS,10 μg/mL)、LPS+siNC 组(LPS 10 μg/mL+50 nmol/L siNC)、LPS+siRIP3 组(LPS 10 μg/mL+50 nmol/L siRIP3)、丹参酮IIA干预组(LPS 10 μg/mL+ 丹参酮IIA 10 mg/L),分别给予以上干预措施。采用TUNEL方法检测各组HK-2细胞的凋亡情况,Western blot检测各组RIP3、Cleaved-caspase3、p18-FUNDC1表达水平,qT-PCR检测RIP3基因表达水平。结果 与对照组相比,LPS作用小鼠24 h后,小鼠Scr及血BUN水平升高,PAS染色提示近段肾小管损伤,肾组织中RIP3、Cleaved-caspase3、p18-FUNDC1蛋白表达上调(P<0.001)。与LPS组相比,丹参酮IIA预处理后,小鼠Scr及BUN水平下降,PAS染色显示近段肾小管损伤减轻,肾组织中RIP3、Cleaved-caspase3、p18- FUNDC1蛋白表达下降(P<0.001)。体外研究显示,与对照组相比,LPS刺激的HK-2细胞后,TUNEL染色显示细胞凋亡水平明显增加,Cleaved-caspase3、RIP3、p18-FUNDC1表达上调(P<0.05)。应用丹参酮IIA预处理或体外沉默RIP3表达后再次予以LPS刺激细胞,TUNEL染色显示细胞凋亡水平较LPS组明显减少,Cleaved-caspase3、RIP3、p18-FUNDC1表达水平较LPS组下降(P<0.05)。结论 丹参酮IIA可能通过抑制RIP3/ FUNDC1信号通路来改善LPS诱导的肾小管上皮细胞凋亡。