南方医科大学学报 ›› 2022, Vol. 42 ›› Issue (9): 1381-1388.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2022.09.15
陈 昕,齐秀春,曹玉净,李 扬,李浩亮,王前进,艾进伟
CHEN Xin, QI Xiuchun, CAO Yujing, LI Yang, LI Haoliang, WANG Qianjin, AI Jinwei
摘要: 目的 探讨靛玉红对大鼠骨关节炎症和损伤的作用及其机制。方法 IL-1β构建骨关节炎细胞模型;0.1、0.5、1、2 μmol/L靛玉红分别与IL-1β共同处理细胞;NPAS2 siRNA或non-specific siRNA转染细胞;四甲基噻唑蓝染色法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测BAX、Bcl-2、ACAN、COL2A1、MMP-13和NPAS2蛋白含量;ELISA检测细胞培养上清液NO、PGE2和TNF-α含量,实时荧光定量 PCR检测NPAS2、ACAN、COL2A1和MMP-13 mRNA含量;构建C57BL/6小鼠骨关节炎模型,Western blot检测靛玉红对骨关节组织BAX、Bcl-2、ACAN和MMP-13蛋白含量的影响。结果 0.1 μmol/L靛玉红对软骨细胞增殖、凋亡、caspase-3活性、BAX和Bcl-2蛋白表达水平无显著影响;0.5、1和2 μmol/L靛玉红上调细胞增殖量和Bcl-2蛋白含量,降低凋亡、caspase-3活性和BAX蛋白含量(P<0.05);0.5 μmol/L靛玉红上调NPAS2、ACAN和COL2A1蛋白和mRNA含量,下调MMP-13蛋白和mRNA、NO、PGE2 和TNF-α含量(P<0.05);干扰NPAS2表达可显著抑制0.5 μmol/L靛玉红对IL-1β诱导的软骨细胞炎症和损伤的保护作用;小鼠骨关节炎模型中BAX和MMP-13蛋白含量上升(P<0.01),而Bcl-2(P<0.05)和ACAN(P<0.01)下降;靛玉红抑制小鼠关节组织中BAX和MMP-13蛋白含量(P<0.01),上调Bcl-2和ACAN蛋白含量(P<0.05)。结论 靛玉红对骨关节炎组织具有保护作用并可能通过NPAS2调节骨关节炎软骨细胞炎症和损伤。