南方医科大学学报 ›› 2020, Vol. 40 ›› Issue (11): 1564-1570.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2020.11.05
杨安桥,黄 炎,张玉婷,杨 凯,王久存,刘庆梅
摘要: 目的 研究垂体肿瘤转化基因(PTTG1)在系统性硬化症(SSc)中的表达及其对成纤维细胞的作用。方法 收集皮肤活检组织,其中SSc患者组21例,正常组22例。分别应用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测皮肤组织中PTTG1基因表达水平;应用免疫组化方法检测皮肤组织中PTTG1蛋白表达水平;应用小干扰RNA(siRNA)降低成纤维细胞中PTTG1基因表达,通过 Real-time PCR 方法检测细胞中 PTTG1 及与细胞纤维化密切相关的几个基因α-SMA、COL1A1、COL1A2、COL3A1的表达变化;通过细胞实时增殖检测系统检测细胞增殖。结果 与正常对照相比,SSc患者皮肤组织中PTTG1的表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与正常对照相比,SSc患者皮肤组织中阳性细胞增多,PTTG1蛋白表达明显升高;原代皮肤成纤维细胞中PTTG1表达水平和α-SMA、COL1A1、COL1A2、COL3A1均存在正相关,差异具有统计学意义(R2=0.8192,P<0.05;R2=0.6398,P<0.05;R2=0.316,P<0.05;R2=0.3723,P<0.05);同时,原代皮肤成纤维细胞中PTTG1干扰后,细胞增殖被显著抑制,纤维化相关基因(COL1A1、COL1A2、PAI-1)表达下降,胶原蛋白的基因表达降低。结论 SSc患者中存在PTTG1过度表达,干扰PTTG1可降低成纤维细胞活性,提示PTTG1与SSc纤维化程度密切相关。