南方医科大学学报 ›› 2019, Vol. 39 ›› Issue (04): 401-.doi: 10.12122/j.issn.1673-4254.2019.04.04
周丹,戴丽霞,刘小莲,阙富昌,许玉燕,罗昕,祝瑶露,刘叔文,李亦蕾,余乐
摘要: 目的探讨硼替佐米联用obatoclax对人急性T淋巴白血病细胞Jurkat是否具有协同抗肿瘤作用。方法MTT法检测单用 硼替佐米和联用Bcl-2 抑制剂(obatoclax,AT-101 和ABT-199)对Jurkat 细胞活力的影响。采用Western blot 方法检测药物对 Bcl-2 家族蛋白、LC3B、p62、ubiquitin、BiP/Grp78、p-JNK、p-p38和CHOP 蛋白表达的影响。硼替佐米和Bcl-2抑制剂对细胞凋 亡的影响。实时荧光定量PCR 检测未折叠蛋白反应(UPR)关键调节因子的mRNA表达水平。斑马鱼异种移植模型研究单药 以及两药联用的体内抗肿瘤作用。结果单用硼替佐米和Bcl-2 抑制剂均可抑制Jurkat细胞活力,但联用时仅obatoclax与硼替 佐米具有协同细胞毒作用,引起细胞凋亡增多。obatoclax 阻断自噬流,伴随LC3B-II 和p62 的蓄积。此外,单用硼替佐米和 obatoclax 可诱导泛素化蛋白的蓄积,两药联用对泛素化蛋白蓄积具有协同作用,与药物联用的协同细胞毒作用实验结果一致。 硼替佐米和obatoclax 联用对蛋白酶体和自噬的双重阻断触发了未折叠蛋白反应,诱导细胞凋亡。内质网应激抑制剂牛磺熊去 氧胆酸(TUDCA)可减弱硼替佐米和obatoclax 联用的细胞毒作用,减少细胞凋亡。在斑马鱼体内联用硼替佐米和obatoclax显 著地减少肿瘤灶形成。结论硼替佐米与obatoclax联用双重阻断蛋白质降解途径对人急性T淋巴白血病细胞具有协同抗肿瘤 作用。