摘要: 摘要:目的研究过氧化氢(H2O2)对正常人支气管上皮细胞(HBE)HMGB1表达、移位和释放的影响。方法四唑盐(MTT)法检
测不同浓度H2O2对支气管上皮细胞活力的影响;蛋白免疫印迹方法分别检测H2O2刺激HBE胞核,胞浆以及细胞培养上清中
HMGB1浓度。免疫荧光观察HBE 的HMGB1的定位和H2O2刺激后对HBE HMGB1的移位的影响。结果125 μmmol/L刺激
对HBE活力无影响,而250 μmmol/L会导致细胞活力下降(与对照组组比较,P<0.05),但是不引起细胞死亡,400 μmmol/L(与对
照组比较,P=0.000)导致HBE死亡。在浓度依赖性实验,与对照组比较12.5、125、250 μmmol/L H2O2刺激HBE 24 h后培养上清
HMGB1水平显著增加;在时间依赖性实验中与对照组比较,125 μmmol/L H2O2刺激HBE 12、24 h后细胞上清中的HMGB1显
著升高(P<0.05);12.5 μmmol/L H2O2刺激HBE 24 h后,HBE胞浆蛋白明显增加,胞核蛋白减少。而免疫荧光检测示HMGB1高
丰度分布正常HBE的细胞核内,少量分布于细胞浆,125 μmmol/L H2O2刺激HBE 12 h,HMGB1 明显从HBE胞核向胞浆转
位;125 μmmol/L H2O2刺激HBE 24 h后观察到HMGB1移位分布到胞膜上。结论H2O2可以显著诱导支气管上皮细胞HMGB1
的表达、转位和释放,提示HMGB1可能参与了哮喘,COPD等慢性炎症疾病气道的氧化应激过程。