摘要： 目的 探究乙酰紫堇灵（Ace）对2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的小鼠克罗恩病（CD）样结肠炎的作用及机制。方法 将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组：WT组、TNBS组和Ace干预组（Ace-10组、Ace-20组和Ace-40组），每组8只。TNBS组和Ace干预组小鼠均采用TNBS诱导建立结肠炎模型，Ace干预组分别给予10、20、40 mg/kg的Ace灌胃治疗，而TNBS组均给予等量生理盐水。通过监测体质量变化、疾病活动评分（DAI）、结肠长度测量、HE染色和组织学评分评估Ace对TNBS结肠炎小鼠的保护作用。小鼠结肠组织经免疫荧光检测Claudin-1、Western blot检测紧密连接蛋白（Claudin-1和ZO-1）和凋亡相关蛋白（C-caspase3、Bax和Bcl-2）以及Tunel染色检测肠上皮细胞凋亡的数量。采用结肠类器官经脂多糖诱导建立凋亡模型，分为Control组、脂多糖组及Ace组，采用免疫荧光检测Claudin-1以及Western blot检测Claudin-1、ZO-1、C-caspase3、Bax和Bcl-2的表达。利用网络药理学预测Ace抑制肠上皮细胞凋亡的分子机制可能与PI3K-AKT通路相关，采用Western blot验证小鼠结肠组织和结肠类器官中p-PI3K和p-AKT的表达。体外凋亡模型中加入PI3K-AKT信号通路激活剂（740Y-P），Western blot验证结肠类器官中p-PI3K、p-AKT、C-caspase3、Bax及Bcl-2的表达。结果 与TNBS组相比，Ace治疗可显著缓解TNBS小鼠的体质量下降、结肠长度缩短、DAI评分和炎症评分升高（P<0.05）。在Ace组小鼠结肠组织中，免疫荧光结果显示：Claudin-1的表达上调（P<0.05）；Western blot结果显示：Claudin-1、ZO-1和Bcl-2的蛋白水平升高，而C-caspase3和Bax的表达降低（P<0.05）；Tunel染色结果显示：肠上皮细胞凋亡数量减少（P<0.05）。在体外凋亡模型中，经Ace干预后，免疫荧光和Western blot结果显示，结肠类器官组织中ZO-1和Claudin-1的表达升高（P<0.05）、C-caspase3和Bax表达降低，而Bcl-2表达升高（P<0.05）。KEGG通路富集预测发现PI3K-AKT信号通路与Ace治疗CD具有相关性，且Western blot结果表明，在体内外模型中经Ace干预后p-AKT和p-PI3K的表达显著降低（P<0.05）。另外，PI3K-AKT激活剂（740Y-P）促进p-PI3K、p-AKT、C-caspase3和Bax的表达，而抑制Bcl-2的表达（P<0.05）。结论 Ace可能通过干扰PI3K/AKT信号的激活抑制肠上皮细胞凋亡，进而发挥对TNBS诱导的小鼠CD样结肠炎的保护作用。