南方医科大学学报 /oa 基于动脉自旋标记与弥散加权成像的ASPECTS评分不匹配可以指导醒后卒中患者的机械取栓治疗 /oa/darticle.aspx?type=view&id=2020011 摘要:目的 快速可靠地评估弥散加权成像(DWI)和动脉自旋标记(ASL)的不匹配对于临床取栓决策至关重要。醒后卒中患者中仅有极少数可进行取栓治疗,本研究回顾性地分析了大血管闭塞的醒后卒中患者的预后,依据入院磁共振ASL及DWI序列ASPECTS不匹配选择患者进行干预。方法 回顾性分析连续12例前循环大动脉闭塞性醒后卒中患者,接受治疗前均进行了磁共振(ASL与DWI)检查。不匹配ASPECTS定义为ASL-ASPECTS与DWI-ASPECTS的差异(分数越高,差别越大)。结果 所有患者取栓治疗后均成功再灌注(脑梗死溶栓分级TICI 2b-3)。11名(91.7%)患者出院时国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分显著降低,8名(66.7%)患者90 d改良Rankin 量表(mRS)评分≤2分。结论 基于ASL和DWI的ASPECTS不匹配可用于快速筛选患者,指导动脉取栓治疗。 2020年01月31 00:00 2020年01期 1 5 3082436 王冬梅,郝 鹏,王梦瑶,林镇洲,周 亮,范祖森,潘 越,张晓梅,潘速跃,姬 仲 高迁移率族蛋白B1在糖尿病伴牙周炎患者牙周组织中的表达及与肝脏脂代谢的关系 /oa/darticle.aspx?type=view&id=2020016 摘要:目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与其下游的晚期糖基化终产物受体(RAGE),肿瘤坏死因子α(TNF⁃α)在糖尿病及牙周炎大鼠牙周组织中的表达,及与免疫代谢重要器官肝脏脂代谢之间的关系。方法 建立糖尿病(DM)、牙周炎(CP)、糖尿病复合牙周炎(DM+CP)大鼠模型。免疫组化染色检测牙周组织中HMGB1、RAGE、TNF-α 的表达,光谱法检测血清中的脂代谢相关指标和肝损生化指标,并进行统计学分析。结果 DM组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE表达显著性高于对照组(P<0.05),TNF-α表达量与对照组无差异;CP组HMGB1及TNF-α表达显著性高于对照组,RAGE表达显著性低于DM及DM+CP组,与对 照组无显著性差异;DM+CP组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE,TNF-α表达均高于对照组。与对照组相比较,DM,CP,DM+CP组可见多项肝脏脂代谢指标异常,其中肝脏损伤指标ALT表达在3组中均显著性升高(P<0.05)。结论 HMGB1,RAGE参与糖尿病大鼠的牙周组织炎症进程,糖尿病导致牙周组织中HMGB1表达升高。在高血糖、牙周炎及高血糖复合牙周炎情况下,均能导致一定程度的肝脏代谢功能紊乱,HMGB1-RAGE为解释糖尿病与牙周炎互为易感的信号通路研究提供了一定的线索。 2020年01月31 00:00 2020年01期 6 12 2209584 裴心佛,孟 姝,苟 册,杜 芹 miR-449a/b负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200113 摘要:目的 探讨miR-449a/b在胃癌发生中的可能作用机制。方法 采用qRT-PCR方法检测了miR-449a/b和E2F1基因在胃癌细胞BGC-823和胃粘膜细胞GES-1表达情况;采用瞬时转染技术将miR-449a/b模拟物(mimic)以及mimic阴性对照分别转入胃癌细胞BGC-823中,qRT-PCR验证转染成功后,通过CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡的变化,细胞划痕实验检测胃癌细胞的迁移能力,Western blot方法检测miR-449a/b上调后其靶基因蛋白的表达水平;并通过转染E2F1过表达质粒和空质粒对照入胃癌细胞BGC-823,Western blot确定转染效率后,分别用qRT-PCR和数字PCR检测miR-449a/b的表达水平。结果 相比于正常胃粘膜细胞株GES-1,miR-449a/b在胃癌细胞株BGC-823中表达均下调(P<0.01);过表达miR-449a/b可抑制胃癌细胞BGC-823增殖和迁移,并促进其凋亡(P<0.05);过表达的E2F1可上调miR-449a/b的表达(P<0.001),而上调miR-449a/b的表达,其直接靶基因CDK4、CDK6表达下调,并可通过CDKs-pRb-E2F1信号通路,间接下调E2F1蛋白的表达(P<0.01)。结论 miR-449a/b的低表达和E2F1的高表达均参与了胃癌的发生、发展,并且miR-449a/b能负反馈调节E2F1抑制胃癌细胞增殖。 2020年01月31 00:00 2020年01期 13 19 1248250 林爱琴,卜文婕,汪 萍,高继光,杨建课,丁飞雨,李铁臣 过表达白血病抑制因子增强子宫内膜癌细胞对化疗药物的耐受 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200120 摘要:目的 探讨在体外环境中,子宫内膜癌细胞高表达白血病抑制因子(LIF)后,对顺铂及紫杉醇的敏感性变化。方法 利用慢病毒在子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)中建立稳定过表达LIF的细胞模型,以空载体慢病毒感染细胞作为对照组,用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验验证LIF的表达。利用CCK-8观察LIF过表达对癌细胞活性的影响,利用Annexin V-FITC/PI法和JC-1法观察LIF过表达后,顺铂及紫杉醇诱导癌细胞凋亡及线粒体膜电位下降的情况。利用免疫印迹观察LIF过表达后,癌细胞中Bcl-2家族及STAT3通路蛋白的表达。利用荧光素酶报告基因活性检测观察LIF过表达后,癌细胞STAT3转录活性的变化。在过表达LIF的两子宫内膜癌细胞中沉默STAT3,以无义小干扰RNA序列转染细胞为对照组,观察顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用。结果 过表达组的子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)较对照组表达更高水平的HLFmRNA及分泌更多的HLF蛋白(P<0.05)。LIF的过表达不影响两子宫内膜癌细胞的体外增殖活性(P>0.05),但能增加癌细胞在顺铂及紫杉醇作用下的存活率和线粒体膜电位(P<0.05)。过表达 LIF 能增加两子宫内膜癌细胞中 Bcl-2、Bcl-xL 和p-STAT3的水平,降低Bax和Bad的水平,而不影响STAT3的水平;同时STAT3的转录活性增强(P<0.05)。在稳定表达LIF的两子宫内膜癌细胞中,沉默STAT3能显著增加顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用(P<0.05)。结论 在体外环境中,稳定高表达LIF能增强宫内膜癌细胞对顺铂及紫杉醇的抵抗。 2020年01月31 00:00 2020年01期 20 26 1859894 阮晓红,钟媚共,刘婉敏,刘琼茹,陆文洁,郑 焱,张 鑫 重组甲硫氨酸酶调控 PI3K/Akt/Glut-1 通路抑制有氧糖酵解促进胃癌细胞凋亡 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200127 目的 探讨重组甲硫氨酸酶(rMETase)对胃癌细胞增殖抑制作用及潜在的分子机制。方法 rMETase(终浓度为0.00、1.25、 2.50 mmol/L)处理胃癌SGC-7901细胞72 h,采用CCK-8法检测SGC-7901细胞活力,倒置显微镜下观察SGC-7901细胞形态变化,平板细胞克隆形成实验检测SGC-7901细胞克隆形成率,流式细胞术分析胃癌细胞凋亡情况及细胞周期变化,比色法和荧光酶标仪检测rMETase对胃癌细胞葡萄糖吸收和乳酸、ATP释放的影响,Western blot分析rMETase对SGC-7901细胞PI3K/Akt通 路、GLUT-1、糖酵解相关蛋白及凋亡蛋白的影响。结果 rMETase能够抑制SGC-7901细胞的增殖和克隆形成、诱导胃癌细胞S期周期阻滞、促进细胞凋亡(P<0.05);随着rMETase的浓度的增加,细胞吸收的葡萄糖降低,并伴随糖酵解产物乳酸和ATP的下降(P<0.001);Western blot结果显示,rMETase作用SGC-7901细胞后,PI3K、p-Akt/t-Akt、GLUT-1,糖酵解关键酶HK2、PFKM、LDHA、抑凋亡Bcl-2的蛋白表达下调,促凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达上调(P<0.01)。结论 rMETase可以通过抑制PI3K/Akt/GLUT-1通路的活性,抑制胃癌细胞有氧糖酵解,诱导胃癌细胞凋亡,抑制SGC-7901细胞增殖,rMETase可能是一种潜在的胃癌治疗药物。 2020年01月31 00:00 2020年01期 27 33 1585263 周立强,李世豪,刘 力,周 祺,袁宜武,辛 林 STAT2在卵巢癌中表达升高并与卵巢癌患者生存不良有关 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200134 目的 探讨信号转导及转录活化因子2(STAT2)在卵巢癌中的表达及与患者预后的相关性,并研究STAT2对卵巢癌细胞转移能力的影响和作用机制。方法 RT-qPCR分析62例新鲜冰冻卵巢癌组织和62例正常卵巢组织中STAT2的mRNA的表达,免疫组化法检测95例卵巢癌石蜡样本和33例正常卵巢石蜡样本中STAT2蛋白的表达,Kaplan-Meier法分析STAT2表达和患者的预后之间的相关性,分析Kaplan-Meier Plotter数据库中STAT2与患者预后之间的关系。Western blot检测STAT2在卵巢癌细胞株中的表达,在最高表达的A2780细胞株中干扰STAT2后,Transwell检测卵巢癌细胞迁移、侵袭能力的变化;以及下游分子EGFR表达水平的变化。结果 卵巢癌组织中STAT2 mRNA的表达高于正常卵巢组织,STAT2 mRNA表达与较差的FIGO分期相 关。免疫组化显示STAT2蛋白在卵巢癌组织中的高表达率为67.4%,高于正常卵巢组织的28.3%;卵巢癌患者中,STAT2蛋白的高表达与患者的腹水量、有无远处转移及FIGO分期相关(P<0.05)。生存分析表明高表达STAT2蛋白的卵巢癌患者的整体生存期 (P=0.021)及无进展生存期(P=0.018)较差。STAT2在卵巢癌细胞株中普遍呈高表达,A2780细胞株中表达最高,用于建立干扰细胞株;干扰STAT2后,A2780细胞迁移和侵袭能力减弱(P<0.01),并且下游分子EGFR的mRNA和蛋白表达水平较对照组均降低。 结论 STAT2在卵巢癌中表达升高,与卵巢癌患者预后不良相关,STAT2可能通过促进EGFR的表达而促进卵巢癌的转移。 2020年01月31 00:00 2020年01期 34 41 1776005 陈 萱,黄静莹,吕育纯 MiR-671-3p靶向DEPTOR而抑制乳腺癌细胞的增殖与侵袭 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200142 目的 研究miR-671-3p对乳腺癌细胞增殖、侵袭生物学功能的影响及其可能的作用机制。方法 以实时荧光定量PCR方法检测正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR3)中miR-671-3p表达情况;检测miR-671-3p 在MCF-7细胞中的转染效率;通过CCK-8法检测miR-671-3p对MCF-7细胞增殖的影响;通过Transwell实验、划痕实验检测miR-671-3p对MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响;Targetscan预测miR-671-3p的靶基因,并通过双荧光素酶法和Western blot法对靶基因DEPTOR进行验证,并检测DEPTOR的表达。结果 miR-671-3p在乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR3的表达量低于乳腺正常上皮细胞MCF-10A的表达。通过mimics、inhibitor分别促进、抑制miR-671-3p在MCF-7细胞中的表达后,结果显示miR-671-3p对乳腺癌细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),对肿瘤细胞的侵袭和迁移有抑制作用(P<0.05)。双荧光素酶结果 显示DEPTOR蛋白为miR-671-3p的直接作用靶点,过表达miR-671-3p可直接抑制DEPTOR蛋白的表达。结论 miR-671-3p直接靶向作用于DEPTOR蛋白从而抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。 2020年01月31 00:00 2020年01期 42 48 1517028 夏 巍,龚德贵,秦晓平,蔡 茁 肿块型活动性肺结核的18F-FDG PET/CT影像表现及其与肺癌的鉴别 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200149 目的 分析肿块型活动性肺结核与肺癌18F-FDG PET/CT影像学特点,探索综合分析PET和CT的多种影像改变鉴别两者的可能性。方法 纳入在CT上呈现为肿块型的实性病灶的活动性肺结核74例和肺癌64例患者,分析患者的年龄、性别以及病灶的18F-FDG PET代谢信息(包括SUVmax、病灶代谢是否高于纵隔血池、病灶中心是否存在放射性缺损)和CT信息(包括病灶大小、空洞、空泡征、分叶征、边缘是否光滑和纵隔/肺窗比值)等参数。通过单因素和多因素分析比较两种疾病的参数,建立鉴别两者的回归公式,通过ROC曲线分析其鉴别诊断效能。结果 肿块型活动性肺结核与肺癌病灶在PET定量指标(SUVmax是否高于2.5)及定性指标(病灶代谢是否高于纵隔血池)方面差异无统计学意义(P>0.05)。单因素分析显示,虽然肿块型活动性结核与肺癌在SUVmax、代谢是否明显高于纵隔血池、患者年龄、病灶大小、空洞以及CT纵隔/肺窗比值等方面差异无统计学意义 (P>0.05),但在患者性别、病灶内有无放射性缺损、空泡征、边缘是否光滑和分叶征等方面的差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示性别、放射性缺损、边缘光滑和分叶征对鉴别两种疾病有价值(P<0.05)。采用 Logistic 回归模型将上述4个因子纳入分析而得活动性结核风险预测模型:P=1(/ 1+e-x),X=-0.530+1.978×性别+3.343×放射性缺损+2.846×边缘光滑-2.116×分叶征。该模型用于诊断肿块型活动性肺结核的灵敏度为78.4%,特异度为92.2%,准确率为84.8%,阳性预测值为92.1%,阴性预测值为78.7%。结论 18F-FDG PET/CT显像仅根据病灶的代谢高低难以将肿块型活动性肺结核与肺癌进行鉴别,综合分析患者性别、病灶是否存在放射性缺损以及病灶边缘信息有助于将大多数活动性结核病灶与肺癌鉴别。 2020年01月31 00:00 2020年01期 49 55 1801645 古嘉媚,任云燕,陈小慧,蒋燕萍,周文兰,王丽娟,韩彦江,王巧愚,吴湖炳 抑郁倾向Itpr2-/-小鼠海马3D-ASL灌注成像改变 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200156 :目的 研究肌醇1,4,5-三磷酸受体2型(Itpr2)全身敲除小鼠(Itpr2-/-小鼠)行为学变化,并利用三维动脉自旋标记(3D-ASL)成像探究海马血流灌注量可能存在的异常情况。方法 将28只Itpr2-/-小鼠作为实验组,20只野生型小鼠作为对照组,采用行为学测试的方法对实验组Itpr2-/-小鼠及对照组野生型小鼠进行抑郁倾向的考察,测试内容包括糖水偏爱实验、悬尾实验、强迫游泳实验以及旷场实验。分别随机选取15只Itpr2-/-小鼠及14只野生型小鼠,进行3D-T2WI结构图像及海马中间层面的3D-ASL图像的采集,计算得出该海马层面的血流灌注图(CBF图),利用ITK-SNAP手动勾画左右海马区域并测出其左侧海马、右侧海马的血流灌注值(CBF值)。结果 行为学测试结果显示Itpr2-/-小鼠出现明显抑郁倾向,糖水偏爱测试显示Itpr2-/-小鼠糖水偏好百分比下降(P<0.05),悬尾实验中Itpr2-/-小鼠的不动时间延长(P<0.05),强迫游泳实验中中Itpr2-/-小鼠的不动时间延长(P<0.01),而旷场实验中两组小鼠行为没有明显差异(P>0.05)。相较于正常对照组小鼠,Itpr2-/-小鼠左侧(P<0.01)及右侧(P<0.01)海马区平均血流灌注量下降,其中实验组Itpr2-/-小鼠及正常对照组小鼠的左侧海马CBF平均值分别为73.30±5.61和95.77±5.10,右侧海马CBF平均值分别为73.53±5.70和100.5±4.70,双侧海马最终计算所得平均值分别为73.42±5.61和98.12±4.75。结论 Itpr2的缺失可能与小鼠抑郁倾向相关,且对海马的平均血流灌注量存在影响。 2020年01月31 00:00 2020年01期 56 60 1059852 曾善美,刘 恺,张竞予,吴玉兰,徐一华,孙学刚,文 戈 miR-145-5p靶向双特异性磷酸酶6对人子宫内膜癌增殖、迁移、侵袭与凋亡的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200161 目的 探讨微小RNA-145-5p(miR-145-5p)靶向双特异性磷酸酶6(DUSP6)对于人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭与凋亡能力的影响。方法 人子宫内膜癌Ishikawa细胞分为A组(未转染组)、B组(mimic NC组)、C组(mimic组)、D组 (inhibitor NC组)、E组(inhibitor组),采用脂质体(Lipo 2000)细胞转染法转染。利用RT-PCR技术验证miR-145-5p的表达;过表达或抑制表达miR-145-5p对Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡影响将运用MTT、伤口愈合、Transwell及凋亡实验检测;运用生物信息学方法预测miR-145-5p的潜在靶基因;运用RT-PCR及Western Blot技术检测细胞转染后下游靶基因DUSP6mRNA及蛋白的表达水平。结果 转染后48、72、96 h,C组比B组细胞增殖能力下降,E组比D组细胞的增殖能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。转染后24、48 h,C组比B组细胞迁移能力降低,E组比D组细胞迁移能力增强(P<0.05)。转染48 h后,C组比B组侵袭能力下降,E组比D组侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.05)。转染48 h后,A组、B组、C组、D组、E组凋亡率分别为(0.66±0.05)%、(0.60±0.03)%、(17.74±1.02)%、(0.72±0.04)%、(0.31±0.02)%,差异有统计学意义(P<0.05)。经生物信息学在线软件预测DUSP6是miR-145-5p的潜在靶基因。转染48 h后,DUSP6 mRNA在A组、B组、C组、D组、E组中的相对表达水平分别为1.00±0.09、1.09±0.08、0.47±0.04、1.03±0.05、4.62±0.26,差异有统计学意义(P<0.05)。其蛋白的相对表达量为0.29± 0.03、0.28±0.04、0.16±0.03、0.32±0.05、0.74±0.05,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-145-5p过表达后能够抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭并且促进癌细胞凋亡,其机制可能是通过负向调节DUSP6的表达而实现。 2020年01月31 00:00 2020年01期 61 66 2387813 门颖超,张 蕾,艾 浩 白脂素包涵体表达纯化及其功能评价 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200167 目的 构建白脂素的原核表达质粒,表达及纯化重组白脂素蛋白,并初步探索其功能,为进一步研究白脂素作用机制及其生理病理作用提供依据。方法 利用基因工程技术构建表达白脂素BL21菌株,经异丙基硫代半乳糖苷诱导,梯度尿素复性,亲和层析纯化及去内毒素处理得到可用于细胞和动物实验的重组白脂素。采用血糖仪检测重组白脂素腹腔注射后C57小鼠血糖变化情况。Alamar Blue检测重组白脂素作用24 h对MIHA细胞活性的影响;重组白脂素刺激MIHA细胞24 h,用蒽酮法检测糖原含量。结果 在37 ℃,A600 nm=0.8,IPTG终浓度为1 mmol/L诱导4 h目的蛋白表达效果较好。通过纯化和去内毒素处理,重组白脂素纯度大于95%,内毒素含量小于1 EU/mg,可以用于动物与细胞实验。腹腔注射重组白脂素60 min后C57小鼠血糖升高至峰值(重组白脂素组 vs 对照组P=0.021),120 min恢复到正常水平(重组白脂素组vs 对照组P=0.03)。重组白脂素刺激MIHA 细胞24 h,对细胞活性没有影响;检测糖原发现,不同浓度白脂素组糖原与对照组比较差异有统计学意义(P1=0.013,P2=0.036, P3=0.011)。结论 通过原核表达系统成功表达及纯化了白脂素蛋白,该方法纯化后的白脂素具有降低MIHA细胞糖原含量及升高小鼠血糖的作用,这为白脂素功能的进一步研究提供了理论依据。 2020年01月31 00:00 2020年01期 67 72 784770 韦雪静,敖青青,孟 玲,徐怡璐,陆彩玲,唐 深,王新航,李习艺 染色体多态性是体外受精胚胎多核形成的重要相关因素 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200173 目的 探讨不孕夫妇不同类型染色体多态性与胚胎多核形成的关系。方法 采用回顾性病例对照研究分析1145对首次接受IVF/ICSI周期的不孕夫妇,术前常规进行染色体核型筛查,根据染色体分成2大组:正常对照组及染色体多态组;染色体多态组再分为染色体臂间倒位亚组、D/G组染色体多态亚组及(1,9,16)qh+多态亚组。比较各组卵裂期胚胎的多核率、临床妊娠率及活产率的差异。结果 1145对夫妇中有139对夫妇(6.10%)至少一方存在染色体多态性,不同染色体多态组与正常对照组在女方年龄、体质量指数、基础促卵泡生成素水平、平均促性腺激素剂量、扳机日雌激素水平、平均获卵数、受精率、优胚率、临床妊 娠率和活产率上均无显著性差异(P>0.05),不同组胚胎多核率分别为:臂间倒位亚组8.23%,D/G组染色体多态亚组4.65%,较正常对照组(2.69%)显著增高(P<0.05),(1,9,16)qh+多态组胚胎多核率(2.77%)与对照组(2.69%)比较无显著差异(P>0.05)。结论 不孕夫妇染色体中臂间倒位和D/G组染色体多态性会增加胚胎多核率(1,9,16)qh+多态对胚胎多核率无影响。 2020年01月31 00:00 2020年01期 73 78 716539 陈志恒,杨 丽,易翠卿,刘 俊,孙 玲 miR-34a-5p通过调控CDK6表达和PI3K/AKT信号通路调节滋 养层细胞的增殖、浸润和凋亡 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200179 目的 探讨miR-34a-5p及CDK6对滋养层细胞增殖,浸润和凋亡的作用和下游机制以及二者的调节关系。方法 培养滋养 层细胞HTR-8/Svneo和人绒毛膜癌细胞系BeWo和JEG-3HTR-8/Svneo,使用RTqPCR法检测3种细胞中miR-34a-5p的表达差 异。根据对HTR-8/Svneo细胞的不同处理进行如下分组:无处理的HTR-8/Svneo细胞(对照组);miR-34a-5p拟似物mimic转染 细胞(mimic组),pcDNA-CDK6和mimic共转染HTR-8/Svneo细胞(pcDNA-CDK6+mimic组),miR-34a-5p抑制剂inhibitor转 染HTR-8/Svneo细胞(inhibitor组)。MTT法检测细胞增殖,ELISA法测定caspase 3活性检测细胞凋亡水平,Transwell实验检 测细胞浸润能力;Western blot 检测细胞周期依赖性蛋白激酶CDK6,凋亡标记物cleaved-caspase 3,浸润标记物MMP-9的表达; 荧光素酶报告基因实验确认miR-34a-5p对CDK-6的直接靶向关系。结果 过表达miR-34a-5p抑制HTR-8/Svneo细胞的增 殖活性(P=0.000)和浸润能力(P=0.049),下调细胞中MMP-9(P=0.004)和CDK6(P=0.014)的表达水平,上调caspase 3活性 (P=0.018)和cleaved caspase 3的表达水平(P=0.003);CDK6是miR-34a-5p的靶基因,过表达CDK6削弱miR-34a-5p对细胞 增殖(P=0.000)、凋亡(P=0.015)和浸润(P=0.046)的作用;使用IFG-1激活PI3K/AKT通路部分逆转miR-34a-5p对细胞增殖 (P=0.011)、凋亡(P=0.004)和浸润(P=0.002)的作用。结论 miR-34a-5p通过调控CDK6表达和PI3K/AKT信号通路激活调节滋 养层细胞的增殖,浸润和凋亡。 2020年01月31 00:00 2020年01期 79 86 1830520 李 勤1,许娟秀 NLRP1炎症体在糖尿病大鼠心肌组织内的表达 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200187 目的 观察高脂高糖饮食和糖尿病分组中核苷酸结合寡聚化结构域样受体1(NLRP1)炎症体在心肌组织中表达的情况,分析其在糖尿病心肌病中潜在的致病机制。方法 将实验大鼠分为3组:正常组、高糖高脂饮食组和糖尿病组。以链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,造模成功8周后行血清学检测各组大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖及空腹胰岛素,并计算得出胰岛素抵抗指数(IRI)和胰岛素敏感性指数(ISI);心脏彩超评估心脏结构及功能;免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测心肌组织NLRP1、ASC和caspase 1的蛋白及mRNA表达等情况。结果 与正常组相比,高糖高脂饮食组体质量、血 清胆固醇、甘油三酯增高,NLRP1 mRNA、caspase 1 mRNA及NLRP1蛋白表达增加(P<0.01),但空腹胰岛素、IRI、ISI、心脏彩超未见明显变化(P>0.05),心肌组织ASC和caspase 1蛋白及血清IL-1β、IL-18水平无明显变化(P>0.05),而糖尿病组中,大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖升高,空腹胰岛素、ISI和体质量降低(P<0.01),左室舒张末期内径、左心室收缩末期内径增大,射血 分数、短轴缩短率及E/A比值下降并伴有NLRP1/ASC/caspase 1通路mRNA同步增加和NLRP1、caspase 1蛋白水平升高,但心肌组织中ASC蛋白表达无明显升高(P>0.05)。此外糖尿病组中IL-1β、IL-18也较正常组升高(P<0.05);与高糖高脂饮食相比糖尿病组大鼠空腹血糖升高伴有空腹胰岛素,ISI和体质量降低(P<0.01),心脏彩超提示左心室收缩末期内径,射血分数及E/A比值下降并伴有NLRP1、caspase 1蛋白表达增加和血清L-1β、IL-18升高(P<0.01)。结论 糖尿病可诱发心脏结构和功能异常及心肌炎症反应,其机制可能与NLRP1/ASC/caspase 1炎症体活化有关。 2020年01月31 00:00 2020年01期 87 92 1059917 戎 李,孙 硕,朱飞宇,赵 懿,高 琴,张 恒,唐 碧,王洪巨,康品方 青蒿琥酯对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞凋亡和Fas、Bcl-2基因蛋白 表达的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200193 目的 观察青蒿琥酯对哮喘小鼠嗜酸性粒细胞(EOS)凋亡以及相关基因Fas和Bcl-2蛋白表达的影响。方法 6~8周龄雌性BALB/c小鼠30只按随机数字表法分为对照组、哮喘组和青蒿琥酯组。除对照组外,其余各组均用卵白蛋白致敏并雾化激发制备哮喘小鼠模型。治疗组从造模第21天开始雾化激发前1 h腹腔注射给药。末次激发24 h后行肺组织染色,流式细胞术检测肺泡灌洗液(BALF)EOS的百分比和凋亡率,TUNEL法检测肺组织EOS凋亡情况,免疫组化法检测肺组织Fas和Bcl-2蛋白的表达。结果 与哮喘组比较,青蒿琥酯组BALF中EOS的百分率下降(P<0.05),BALF和肺组织中EOS凋亡率升高(P<0.05)。肺组织中Fas蛋白的阳性面积和IOD升高(P<0.05),Bcl-2蛋白的阳性面积和IOD降低(P<0.05)。结论 青蒿琥酯可调节Fas和Bcl-2的蛋白表达减少肺组织EOS浸润,促进EOS凋亡。 2020年01月31 00:00 2020年01期 93 98 2027513 王瑞茵,林江涛,王静茹,李春晓 维生素D受体与MCP-1在系统性红斑狼疮患者中的表达及意义 /oa/darticle.aspx?type=view&id=20200199 目的 观察维生素D受体(VDR)在系统性红斑狼疮患者(SLE)中的表达以及与单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的关系。方 法 共计纳入中南湘雅三医院肾脏风湿科住院SLE患者60 例和募集28 例健康志愿者作为研究对象。使用实时荧光定量聚合链反应方法(QRT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)的VDR mRNA和MCP-1 mRNA,Western blot检测VDR蛋白表达,ELISA法检测外周血MCP-1水平,使用单因素方差分析、Pearson相关分析进行统计学分析。结果 我们发现SLE患者PBMC的VDR mRNA及蛋白表达量均显著低于正常对照组(P<0.01),活动组低于非活动组(P<0.05);SLE患者PBMC的MCP-1mRNA及血清水平显著高于正常对照组(P<0.01),活动组高于非活动组(P<0.01);Pearson相关分析显示PBMC VDR mRNA与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈负相关(r=-0.417,P=0.001);VDR mRNA与MCP-1 mRNA、VDR蛋白与血清MCP-1浓度分别呈负相关(r=-0.554,P=0.000;r=-0.400,P=0.028)。结论 本研究表明SLE患者PBMC的VDR表达下调与SLE疾病活动度成负相关,且可通过影响MCP-1的表达在SLE发病过程中发挥重要作用。 2020年01月31 00:00 2020年01期 99 103 975243 黄雨茜,张 浩,张 双,孙 剑 基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制因子-1在老年肌少症大 鼠中的表达及意义 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001104 目的 观察肌少症大鼠骨骼肌质量、力量的变化以及基质金属蛋白酶(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)及Ⅰ型胶原的表达。方法 11 只5 月龄SD大鼠作为成年对照组(YC组);18只24月龄SD大鼠根据双能X线吸光测定得到的相对瘦质量(瘦质量%)分为两组,其中9只大鼠为老年对照组(OC组),9只大鼠为老年肌少症组(OS组),分组标准为YC组相对瘦质量较OS组高2SD;大鼠喂养4周后处死;电子抓力仪测量大鼠前肢抓力;HE染色和天狼星红染色观察大鼠腓肠肌细胞外基质变化;Western blot检测MMP-1、TIMP-1及Ⅰ型胶原的蛋白表达量。结果 老年对照组相对抓力低于成年对照组(P<0.01),瘦质量%与成年对照组无统计学差异(P>0.05),HE染色和天狼星红染色示细胞外基质较成年对照组增多,Ⅰ型胶原、TIMP-1的表达高于成年对照组(P<0.05),MMP-1的表达与成年对照组无统计学差异(P>0.05);与老年对照组相比,老年肌少症组相对抓 力未见显著性差异(P>0.05),瘦质量%显著下降(P<0.01),HE染色及天狼星红染色示细胞外基质增多,Ⅰ型胶原、TIMP-1的表达增多(P<0.05),MMP-1的表达降低(P<0.05)。结论 增龄过程中骨骼肌MMP-1/TIMP-1失衡,影响细胞外基质代谢,导致细胞外胶原纤维增多,进而影响骨骼肌质量和功能,可能是肌少症发病的重要原因之一。 2020年01月31 00:00 2020年01期 104 109 1736172 朱师宇,吕安康,赵宇星,蒲 蝶,廖芷吟,孙 悦,陈金梁,肖 谦 环磷酰胺对铁过载小鼠骨髓造血干细胞的影响 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001110 目的 研究环磷酰胺对铁过载小鼠骨髓造血干细胞的影响。方法 建立铁过载小鼠模型,随机将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、低剂量组(0.25 g/kg)、中剂量组(0.5 g/kg)、高剂量组(1 g/kg)。模型组小鼠腹腔注射不同浓度及剂量的右旋糖酐铁,对照组小鼠注射磷酸缓冲盐溶液(PBS液)0.2 mL/次,观察体质量及肝脾、骨髓等脏器改变,检测血清铁蛋白水平;进一步选择中剂量组模型小鼠按不同时间点分组(D1,D2,D3,D4,D5,D6,D7,D14),连续2 d腹腔注射环磷酰胺(Cy)50 mg/kg,对照组小鼠注射PBS液0.2 mL/次,建立铁过载小鼠Cy预处理模型,流式细胞仪检测骨髓单个核细胞(BMMNCs)、造血干细胞(HSCs)细胞数目及其在细胞周期中的分布、骨髓微环境等变化情况。结果 与对照组小鼠相比,铁过载组小鼠体质量明显降低、血清铁蛋白明显升高、肝脾明显增大、脏器铁沉积明显,差异具有统计学意义(P<0.05);铁过载组小鼠外周血未见明显改变;Cy小鼠外周血白细胞(WBC)数目、淋巴细胞百分率(YM%)第1~4天明显降低,第4天降至最低,差异具有统计学意义(P<0.05);铁过载小鼠BMNNCs、造血祖细胞(HPCs)数目未见明显改变,但HSCs、长期造血干细胞(LT-HSCs)数目减少,差异具有统计学意义(P<0.05);而Cy组HSCs数量变化第1天开始升高,第3天升至最高,差异有统计学意义(P<0.05);铁过载小鼠细胞周期分布未见明显改变;Cy组小鼠DNA合成前期(G0/G1期)细胞比例在第1~3天明显减少,第3天降至最低,差异有统计学意义(P< 0.05)。结论 通过腹腔注射不同剂量的右旋糖酐铁,成功建立铁过载三级危险模型。研究显示铁沉积在骨髓并对骨髓长期造血干细胞造成损伤,但是未引起外周血血象的改变;Cy 50 mg/kg连续2 d使铁过载小鼠更多静息状态的HSC进入细胞周期,起到动员造血干细胞的作用,并且在第4天动员作用最大。 2020年01月31 00:00 2020年01期 110 117 1719737 徐艳军,易甜甜,徐肖肖,裴夫瑜,何岳林,吴学东 白芍总苷抑制小鼠T淋巴细胞体外增殖促进活化诱导细胞死亡 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001118 目的 研究白芍总苷(TGP)对小鼠T淋巴细胞体外增殖及活化诱导细胞死亡(AICD)的影响,并初探其免疫抑制机制。方 法 利用免疫磁珠分选技术,无菌分离小鼠脾脏T淋巴细胞,按照TGP溶液浓度(0、50、100、200 µg/mL)设为空白组、TGP低中高剂量组,anti-CD3/CD28刺激T淋巴细胞活化及增殖。流式细胞仪检测细胞早期活化标志、细胞活力及CFSE标记的T淋巴细胞增殖;RT-PCR检测Fas/FasL mRNA水平;流式细胞仪检测活化T淋巴细胞表面Fas/FasL蛋白表达量;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果(1)与空白组相比,TGP中高剂量组在用药48 h后活细胞数目显著减少,活细胞比例明显下降(P<0.001);(2)TGP组给药处理48 h后,T淋巴细胞分裂代数及已分裂比例显著降低,且抑制作用具有药物浓度依赖性(P<0.001);(3)TGP处理组T淋巴细胞24 h后Fas mRNA表达量显著上调,并伴随着T淋巴细胞表面Fas蛋白的表达上调及胞内Bcl-2表达下调(P<0.01)。结论 TGP显著抑制T淋巴细胞增殖,并可通过上调Fas、下调Bcl-2的表达促进活化诱导的T淋巴 细胞死亡(AICD)。 2020年01月31 00:00 2020年01期 118 124 1708658 熊传锋,齐杰莹,邓 蓉,谢丽芬,李长征,聂晓莉 快速眼动睡眠行为障碍患者大脑结构网络特性的改变 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001125 目的 探讨特发性快速眼动睡眠行为障碍患者临床行为及大脑结构网络的改变。方法 对20例特发性快速眼动睡眠行为障碍患者(iRBD组)和22例健康对照者(HC组)进行UPDRS评分及Hoehn-Yahr分期测评,并进行大脑磁共振弥散张量扫描,利用图论方法分析脑结构网络拓扑特征,分析行为变化与脑网络拓扑特征改变的相关性。结果 iRBD组UPDRS评分明显高于HC组(P<0.05)。与HC组相比,iRBD组网络整体拓扑属性:小世界属性无统计学差异(P>0.05),iRBD组特征性最短路径长度Lp明显缩短(P<0.05),整体效率Eglob、局部效率Eloc和网络同配性明显增加(P<0.05);iRBD组网络局部拓扑属性:iRBD组 额、颞、顶、枕及纹状体和边缘叶均出现节点属性异常,左苍白球节点度明显增高。左丘脑、颞上回、颞极和左右枕上回、右左豆状核以及右侧直回、杏仁核、缘上回、颞中回的节点效率明显增高,左额上回、扣带回中部、顶上回和左右纺锤回以及右运动上 区、中央后回、角回的节点局部效率明显增高。左运动上区、苍白球、丘脑、颞上回、颞极和左右豆状核、左右枕上回以及右直回、杏仁核、缘上回、颞中回节点最短路径明显缩短,左侧枕上回节点集群系数明显降低。iRBD组UPDRSⅠ评分与右侧缘上回节点效率、右侧纺锤回局部节点效率正相关(r=0.50、0.53,P<0.05),与左侧枕上回节点集群系数负相关(r=-0.552,P<0.05)。结论 iRBD存在精神、行为、情绪、日常生活活动及运动方面异常,其大脑结构网络仍存在小世界属性,整体拓扑属性出现异常,局部拓扑属性异常分布于皮层、纹状体及边缘系统。 2020年01月31 00:00 2020年01期 125 130 880884 张蕊蕊,李中林,白莹莹,许鹏飞,张杰文,张红菊 持续性姿势-知觉性头晕患者睡眠障碍与认知功能障碍 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001131 目的 研究持续性姿势-知觉性头晕(PPPD)患者的睡眠与认知状况,以期通过改善患者睡眠质量,来改善其认知功能。方 法 采用简易智力状态检查量表(MMSE)、蒙特利尔量表(MoCA)、匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)和多导睡眠监测(PSG)对70例PPPD患者进行睡眠质量和认知功能状况的调查,分析其相关性。结果(1)MMSE总分为25.10±3.87,在轻度认知障碍的范围内;MoCA总分为23.10±6.11,在轻度认知障碍的范围内;PSQI总分为14.60±2.06,在中度失眠患者的范围内;(2)PPPD患者在MMSE上的注意力、记忆力、回忆能力3个维度、MoCA上的视空间与执行能力、注意力、延迟回忆3个维度与PSQI上睡眠 质量、睡眠潜伏期、睡眠时间、睡眠效率、睡眠紊乱、日间功能障碍等维度均呈显著正相关。结论 PPPD 患者普遍存在着中度睡眠障碍和轻度认知功能障碍,其睡眠质量与认知功能水平存在相关性,提示改善PPPD患者的睡眠质量有助于改善其认知功能。 2020年01月31 00:00 2020年01期 131 136 744327 梅俊华,张 琦,龚 雪,徐金梅,潘宋斌,潘晓峰,王俊力,刘敏珍,陈国华 大学生应对方式与失眠的关系:反刍思维的中介效应 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001137 目的 探讨大学生反刍思维在应对方式与失眠之间的中介效应。方法 采用失眠严重程度指数(ISI)、反刍思维量表(RRS)、特质应对方式问卷(TCSQ)对四川省某所高校767名大学生进行调查。结果 大学生失眠检出率为36.6%;积极应对与RRS总分及各维度得分呈显著负相关(r=-0.127~-0.116,P<0.01),与ISI总分呈显著负相关(r=-0.159,P<0.001);消极应对与RRS总分及各维度得分呈显著正相关(r=0.298~0.334,P<0.001),与ISI总分呈显著正相关(r=0.264,P<0.001);RRS总分及各维度得分与ISI总分呈显著正相关(r=0.251~0.281,P<0.001);反刍思维在积极应对、消极应对与失眠之间均存在部分中介效应。 结论 应对方式既可以直接影响大学生的失眠状况,也可以通过反刍思维的中介效应间接影响其失眠状况。 2020年01月31 00:00 2020年01期 137 141 784684 余 佳,刘可智,刘 帅 网络化认知行为治疗在失眠障碍中的应用和研究进展 /oa/darticle.aspx?type=view&id=202001142 失眠障碍是最常见的睡眠障碍之一,且发病率呈现不断增长趋势,带来巨大的经济和社会损失。失眠障碍的治疗主要包括药物治疗和认知行为治疗,药物治疗不良反应多,且易成瘾,目前认知行为治疗为失眠障碍的一线治疗。由于面对面失眠认知行为治疗存在费用高、操作不统一规范等弊端,网络化失眠认知行为治疗逐渐兴起,其治疗效果优于药物治疗,且与面对面失眠认知行为治疗效果相当。本文对失眠认知行为疗法的基本原理和网络化认知行为治疗的发展、形式、疗效以及优缺点进行综述。 2020年01月31 00:00 2020年01期 142 146 614795 杨璐璐,康尹之,张菀凌,张 斌