[1]李彩霞,白鹏,赵娴,等.高效能沉默BMP-7 基因siRNA序列的实验筛选[J].南方医科大学学报,2015,(03):403.
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高效能沉默BMP-7 基因siRNA序列的实验筛选()
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《南方医科大学学报》[ISSN:1673-4254/CN:44-1627/R]

卷:
期数:
2015年03期
页码:
403
栏目:
出版日期:
2015-03-20

文章信息/Info

Title:
Screening of highly efficient small interfering RNAs against bone morphogenetic
protein-7
作者:
李彩霞白鹏赵娴董苑代晓明李逸松刘流
关键词:
骨形态发生蛋白筛选小干扰RNA
Keywords:
bone morphogenetic protein-7 screening small interfering RNA
摘要:
目的骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein-7, BMP-7)是一种促进骨和软骨再生的关键性生长因子,旨在筛选高
效能BMP-7siRNA序列,为后续探讨BMP-7的生物学作用机制的基础和临床应用研究提供实验研究技术手段。方法本实验
针对BMP-7基因,构建出相应4条siRNA序列,分别将其转染至大鼠脐静脉内皮细胞,转染72 h后用Wb和RT-PCR方法检测
BMP-7蛋白和BMP-7 mRNA表达水平,筛选出最高效的BMP-7siRNA序列。结果人工合成的4条BMP-7siRNA序列都能有
效抑制大鼠脐静脉内皮细胞的BMP-7表达,其中BMP-7-3siRNA序列抑制效果最为明显,抑制率大于90%,被确认为体外抑制
BMP-7表达最为有效的干扰序列。结论BMP-7-3 siRNA序列能够在体外高效能抑制BMP-7表达,故可作为一种实验研究技
术手段,用于探讨BMP-7的生物学作用机制的基础和临床应用研究。
Abstract:
Objective To obtain highly efficient small interfering RNAs (siRNAs) against bone morphogenetic protein-7 (BMP-7)
for future functional analysis of BMP-7 in bone homeostasis. Methods We designed 4 independent siRNA sequences against
rat BMP-7 and transfected them in rat umbilical vein endothelial cells. After 72 h, we examined BMP-7 mRNA and protein
level in the transfected cells using real-time PCR and Western blotting, respectively. Results All the 4 siRNAs effectively
reduced BMP-7 expression in rat umbilical vein endothelial cells, and among them BMP-7-3 siRNA showed the highest
efficiency. Conclusion We have obtained an efficient siRNA to knockdown BMP-7 expression in vitro for further investigation
of the role of BMP-7 in bone and cartilage formation.

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更新日期/Last Update: 1900-01-01