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RNA干扰抑制CD133 表达对CD133+肝癌干细胞增殖和化疗敏感性的影响()

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《南方医科大学学报》[ISSN:1673-4254/CN:44-1627/R]

Title:: Lentivirus-mediated RNA interference of CD133inhibits the proliferation of CD133+ liver cancer stem cells and increases their cisplatin chemosensitivity

Keywords:: CD133; CD133+ liver cancer stem cells; RNA interference; cisplatin

摘要:: 目的利用慢病毒介导的RNA干扰技术下调CD133+
HepG2肝癌干细胞中CD133的表达，探讨其对肝癌干细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法利用流式分选技术筛选CD133+
HepG2细胞并检测分选前后CD133表达量，体外成球及体内成瘤实验
鉴定其“干性”；随后以CD133mRNA编码序列为干扰靶点，采用慢病毒介导的shRNA转染CD133+细胞。应用RT-PCR和
Western Blot检测CD133mRNA及蛋白表达，克隆形成实验检测转染前后细胞增殖情况，CCK-8法和流式细胞仪检测在化疗药
物顺铂作用下转染前后细胞的生长抑制率及凋亡情况。结果分选前后CD133表达率分别为（3.36±1.80）%，（ 88.74±3.19）%；
CD133+细胞相对于CD133-细胞有更强的体外成球和体内成瘤能力；转染CD133shRNA后的细胞CD133mRNA表达明显受到
抑制（P<0.05），蛋白表达水平降低，增殖能力显著下降（P<0.01）。顺铂对转染CD133shRNA后细胞生长抑制作用明显提高（P<
0.01），且其在顺铂作用下的凋亡率也显著增加（P<0.05）。结论慢病毒介导的shRNA能显著下调CD133+肝癌干细胞CD133基
因的表达，抑制其增殖并提高其对顺铂的敏感性。

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更新日期/Last Update: 1900-01-01