[1]田平阁,周春平,张超,等.靶向肿瘤干细胞标记CD133特异性结合肽的筛选和初步鉴定[J].南方医科大学学报,2011,(05):761.
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靶向肿瘤干细胞标记CD133特异性结合肽的筛选和初步鉴定()
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《南方医科大学学报》[ISSN:1673-4254/CN:44-1627/R]

卷:
期数:
2011年05期
页码:
761
栏目:
出版日期:
2011-05-15

文章信息/Info

作者:
田平阁周春平张超杨慧吴小金陆滟霞刘国炳李学农
关键词:
肿瘤干细胞CD133噬菌体展示肽库
摘要:
摘要:目的筛选可与人肿瘤干细胞表面标记物CD133特异性结合的短肽并进行初步鉴定。方法首先合成人肿瘤干细胞
表面标记物CD133 细胞外片段的生物素化蛋白,以此为靶,利用噬菌体肽库技术,高通量液相淘选CD133 的特异性短
肽。应用夹心EL ISA选择出结合较强的克隆。提取DNA测序,通过竞争性阻断实验验证其特异性,根据噬菌体基因序
列推导出多肽序列。通过免疫荧光技术初步验证合成多肽和人大肠癌细胞的结合情况。结果4 轮液相筛选后,与
CD133特异性结合的噬菌体得到有效富集,第4轮与第1轮相比,富集了388倍。经ELISA 鉴定的20个噬菌体单克隆中,
有13个与CD133有较高亲和力,具有阳性意义。经比对得到11条完全一致的氨基酸序列TISWPPR,2条完全一致的氨
基酸序列STTKLAL,竞争性阻断ELISA实验表明第一条特异性较强。结论成功利用噬菌体肽库技术,淘选出1条可和
人CD133特异性结合的高亲和力短肽,为后续CD133的研究奠定了基础,表明从噬菌体肽库中液相淘选生物素化小分子
的高亲和力多肽的方法切实可行。

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更新日期/Last Update: 1900-01-01