[1]陈敏芳,麦荣嘉,莫倩珍,等.日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应[J].南方医科大学学报,2012,(04):456.
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日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应()
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《南方医科大学学报》[ISSN:/CN:]

卷:
期数:
2012年04期
页码:
456
栏目:
出版日期:
2012-04-15

文章信息/Info

作者:
陈敏芳麦荣嘉莫倩珍周晓红
关键词:
关键词:日本血吸虫小热休克蛋白RNA干扰dsRNA
摘要:
摘要:目的研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP) Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基
因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平。方法以双链RNA
(dsRNA)实现RNA干扰。体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转
染到日本血吸虫成虫中,体外培养7 d 后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40 基因及
SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90 基因mRNA的表达,Western blot 检测Sjp40 蛋白表达产物。提取各期虫体总RNA,qPCR 检测
Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90 基因的mRNA表达。结果转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照
GFP dsRNA转染组下降了80%左右;蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因
RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化。此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时
期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高。结论dsSjp40 RNAi可特异性抑制
Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响。
更新日期/Last Update: 1900-01-01