[1]王妮娜,谢剑明,郑大勇,等.稳定表达MACC1的胃癌BGC-823/pBaBb-puro-MACC1细胞株的建立及其肿瘤相关基因的研究基因[J].南方医科大学学报,2012,(03):312.
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稳定表达MACC1的胃癌BGC-823/pBaBb-puro-MACC1细胞株的建立及其肿瘤相关基因的研究基因()
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《南方医科大学学报》[ISSN:1673-4254/CN:44-1627/R]

卷:
期数:
2012年03期
页码:
312
栏目:
出版日期:
2012-03-01

文章信息/Info

作者:
王妮娜谢剑明郑大勇左强廖旺军
关键词:
关键词:MACC1293FT细胞载体构建基因芯片
摘要:
摘要:目的构建含有全长肠癌转移相关基因( MACC1) 的表达载体,建立稳定表达MACC1 的胃癌BGC-823/
pBaBb-puro-MACC1细胞系,通过基因芯片技术筛选出转染MACC1后胃癌细胞株的差异表达基因,探讨MACC1基因与差异
基因之间可能的调节机制或信号通路。方法以人胚肾293FT细胞为模板,经PCR扩增获全长MACC1 cDNA序列,将目的基
因序列克隆入带有绿色荧光蛋白报告基因的pBaBb-puro表达载体,建立pBaBb-puro-MACC1表达载体。经限制性内切酶酶切
鉴定、测序并转染293FT细胞观察报告基因表达情况判断是否构建成功。构建成功后的pBaBb-puro-MACC1表达载体转染人
胃癌BGC-823细胞,建立稳定表达MACC1的BGC-823/pBaBb-puro-MACC1细胞。qRT-PCR及western blot检测转染细胞的
MACC1基因表达,应用基因芯片技术筛选出转染MACC1基因后胃癌细胞株的差异表达基因并对其探讨研究。结果成功扩
增全长MACC1cDNA,经测序鉴定序列完全正确;转染293FT细胞可见清晰的绿色荧光表达。BGC-823/pBaBb-puro-MACC1
细胞能够稳定表达MACC1。基因芯片筛选出差异基因发现上调基因33个,下调基因24个,这些差异表达基因的功能涉及多个
方面。结论成功构建了含有全长MACC1cDNA的表达载体系统,建立了稳定表达MACC1的BGC-823/pBaBb-puro-MACC1
细胞,通过对差异基因的分析发现MACC1 可能引起胃癌细胞株BGC-823 基因表达谱中一些非常重要的分子的改变,为
MACC1基因进一步研究奠定了良好基础。

相似文献/References:

[1]王小军,张浩,郑杰,等.真核表达人Wnt7b基因建立软骨细胞退变模型[J].南方医科大学学报,2015,(03):370.

更新日期/Last Update: 1900-01-01